本發明公開一種火龍果花多糖的制備方法，包括以下步驟：(1)取火龍果花，干燥粉碎過篩；按每kg物料加5～8L pH5.5～6.0的水混合，然后進行蒸汽爆破：5～20min內升壓至0.5～1.2MPa，溫度110～130℃，維壓3～10min；(2)加pH4.0～6.0的水浸提，離心，收集上清，調節pH6.5～7.0，濃縮，加乙醇溶液醇沉，凍干；(3)用pH5.0～5.5的水將步驟(2)所得干燥樣品配制成溶液，用大孔樹脂靜態吸附6～8h，抽濾收集濾液，凍干；(4)用0.2～0.5mol/L的氯化鈉水溶液將步驟(3)所得干燥樣品配制成溶液，進行凝膠柱層析；先用pH6.5～7.0的水洗脫3～5個柱體積，棄洗脫液，再用pH 5.0～5.5的水洗脫，收集洗脫液；(5)洗脫液濃縮，醇沉，冷凍干燥。本發明不僅得到分子量均一的3～7kDa小分子多糖，且得率和純度也較高，純度達到80％以上，得率達到5～9％。

技術領域

本發明涉及植物多糖制備技術領域，具體涉及一種火龍果花多糖的制備方法。

背景技術

火龍果(Hylocerus undatus)又名紅龍果、龍珠果等，為仙人掌科量天尺屬植物，我國海南、廣東、廣西、福建和云南等省區均大量種植，其花具有清熱痰、除積熱、止氣痛等功效。火龍果花中包含多種活性成分，包括多糖、皂苷、植物甾醇、黃酮、維生素E等，其中多糖是主要的活性成分。火龍果花多糖中不同分子量的多糖成分的功效有所不同，因此，提供一種可提取特定分子量火龍果花多糖的提取方法成為必要。

目前火龍果花多糖的提取工藝涉及的方法有水提醇沉法、酶提法、微波輔助提取法和超聲波輔助提取法。水提醇沉法是傳統的提取方法，所需設備簡單，但純度和提取率方面效果不佳。酶提取法能極大地提高多糖得率和縮短提取時間，且該方法通常在較溫和的條件下進行，對多糖結構影響較小。但因酶具有高度專一性，選擇適宜的酶就顯得尤為重要。同時提取的溫度、pH、時間均會影響提取效率，且酶價格較昂貴，用量大，極大地限制了該方法的使用。微波輔助提取法通過微波使溶劑迅速氣化，進而在細胞膜和細胞壁上形成大量孔洞，有利于多糖釋放。超聲波輔助提取法通過超聲波增加溶劑的穿透力，可縮短提取時間，提高提取效率。超聲和微波提取法可協同用于多糖提取，但上述兩種方法能耗較大、成本高，產業上的使用受到限制。可見，目前適用于火龍果花多糖的提取方法不同程度的存在提取率和純度不夠高、成本高等問題。

發明內容

前期研究結果顯示，分子量3～7kDa的火龍果多糖具有明顯的提高免疫力的活性，基于前期研究結果，為了更有利于該多糖的推廣應用，本發明的目的是提供一種適用于分子量3～7kDa火龍果花多糖且提取率和純度較好的火龍果花多糖制備方法。

本發明方案包括以下方面：

一種火龍果花多糖的制備方法，包括以下步驟：

(1)取火龍果花，干燥，粉碎過篩；取過篩后物料，按每kg物料加5～8L pH5.5～6.0的水混合，然后放入蒸汽爆破裝置進行蒸汽爆破，蒸汽爆破裝置于5～20min內升壓至0.5～1.2MPa，蒸汽爆破時的溫度是110～130℃，并維壓3～10min；

(2)取步驟(1)所得物料，加pH4.0～6.0的水，水浴浸提，離心，收集上清，調節pH6.5～7.0，濃縮，加乙醇溶液，醇沉，冷凍干燥；

(3)用pH5.0～5.5的水將步驟(2)所得干燥樣品配制成溶液，用大孔樹脂吸附，溶液毫升數和大孔樹脂的克數比例為(10～15):1，靜態吸附6～8h，抽濾收集濾液，冷凍干燥；

(4)用0.2～0.5mol/L的氯化鈉水溶液將步驟(3)所得干燥樣品配制成溶液，進行凝膠柱層析；先用pH6.5～7.0的水洗脫3～5個柱體積，棄洗脫液，再用pH 5.0～5.5的水洗脫，收集洗脫液；

(5)洗脫液濃縮，醇沉，冷凍干燥。

優選的，所述大孔樹脂選自D101、XDA-4、AB-8、XDA-6和D113。