[其他]膠原酶制備工藝無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 85103913 | 申請(qǐng)日： | 1985-06-19 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN85103913A | 公開(kāi)（公告）日： | 1986-12-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 卞祖寧;于保貞;王若駒;張蓓蕾;許海寶;孫憶華 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 國(guó)家醫(yī)藥管理局上海醫(yī)藥工業(yè)研究院 |
| 主分類號(hào)： | C12N9/54 | 分類號(hào)： | C12N9/54;// |
| 代理公司： | 上海市專利律師事務(wù)所 | 代理人： | 王巍,馮佩玉 |
| 地址： | 上海市北京西*** | 國(guó)省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | 本發(fā)明屬于酶工程或生物工程的技術(shù)領(lǐng)域。膠原酶是一種在生理pH及溫度條件下水解天然膠原酶的水解蛋白酶，我們將組織梭菌Cl·histolyticum64008經(jīng)改進(jìn)的培養(yǎng)基、發(fā)酵液靜止發(fā)酵得到毒性低的膠原酶，將發(fā)酵液經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾，硫酸銨沉淀、脫鹽、凍干獲得膠原酶粗品，再經(jīng)DEAE柱層析及SephadexG-25脫鹽，凍干后可得精品，該膠原酶是細(xì)胞分離的重要工具酶，其油膏制劑用于治療清瘡脫痂，其注射用于治療椎脊盤(pán)突出癥 | ||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 膠原酶 制備 工藝 | ||
【主權(quán)項(xiàng)】：
1、一種利用組織梭菌Cl，histolgticum64008經(jīng)培養(yǎng)發(fā)酵后再經(jīng)DEAE纖維素及分子篩分離提純膠原酶的工藝，本發(fā)明的特征在于將菌種經(jīng)組份為酵母膏0.2-1%，酵母粉0.2-1%，明膠1-3%，肉胨2-6%的培養(yǎng)基在溫度為37-42℃，周期40-45小時(shí)靜止發(fā)酵后，無(wú)菌過(guò)濾，在10℃以下加硫酸銨沉淀膠原酶，使?jié)舛冗_(dá)到45-55%(重量/體積)，所獲沉淀溶于PH7-8Tris-Ca++緩沖液在低溫與氮?dú)饧訅合陆?jīng)招濾膜脫鹽，冷凍干燥獲膠原酶粗品，然后經(jīng)以PH5-6，HAC-NaAc緩沖液平衡之DEAE纖維素柱層析，下柱液再經(jīng)PH6.0-7.5電導(dǎo)水平衡的SephadexG-25粒，得到溶液經(jīng)冷凍干燥即為膠原酶精品。
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