[其他]用嗜熱放線菌生產固定化葡萄糖異構酶的方法及其用于高果糖糖漿的生產方法

在審

• 申請號: 101985000000412
• 申請日: 1985-06-25
• 公開（公告）號: CN85100412B
• 公開（公告）日: 1988-02-10
• 發明（設計）人: 賀家明;袁建國
• 申請（專利權）人: 山東省食品發酵工業研究所
• 代理公司: 山東省專利服務處
• 代理人: 徐槐

1、使用新的嗜熱放線菌（嗜熱鏈霉菌，Streptomyces）菌株生產固定化葡萄糖異構酶的方法，其特征在于所說的菌株Streptomyces M1033分泌胞外酶，胞外酶產生量占總酶的80%以上。該方法包括：

〈一〉培養（第一步異構酶菌種斜面，第二步種子罐，第三步發酵罐）。

〈二〉分離發酵液（板框壓濾）。

〈三〉固定（掛酶）。

2、按照權利要求1所述的方法，其特征在于生產酶所用的菌株是Streptomyces M1033，其寄存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，寄存號為：CGMCC NO0032。

3、按照權利要求1和2所述的〈一〉培養（第一步異構酶菌種斜面，第二步種子罐，第三步發酵罐）方法，其特征在于培養的

第一步 異構酶菌種斜面：是菌種首先在淀粉1-3%，硝酸鉀0.05～0.5%，磷酸氫二鉀0.01～0.1%，硫酸鎂0.01-0.1%，氯化鈉0.01-0.1%，硫酸亞鐵0.001-0.005%，瓊脂1.5-2%的斜面培養基上高溫30°-50℃培養4-6天。

第二步 種子罐：是把第一步得到的菌種斜面的胞子放入含麩皮3-8%，豆餅0.5-2%，硫酸鎂0.05-0.2%，磷酸氫二鉀0.05-0.2%，氯化鈷0.005-0.05%，PH6.5-7.5的培養基上，通氣量0.1升/升/分，高溫35°-45℃培養種子15-24小時。

第三步 發酵罐：是把第二步得到的種子液以5-15%的接種量放入發酵罐內，用含有麩皮3-8%，豆餅0.5-2%，硫酸鎂0.05-0.2%，磷酸氫二鉀0.05-0.2%，氯化鈷0.005-0.05%，PH6.5-7.5的培養基上，通氣量0.1-1升/升/分，高溫35°-45℃發酵55-70小時，發酵液最后PH8-9。

4、按照權利要求1和2所述的〈二〉分離發酵液（板框壓濾）方法，其特征在于把〈一〉培養（第一步異構酶菌種斜面，第二步種子罐，第三步發酵罐）所得到的發酵液，在室溫下，用板框過濾機，經普通濾布過濾，得到清發酵液。

5、按照權利要求1和2所述的〈三〉固定（掛酶）方法，其特征在于把〈二〉分離發酵液（板框壓濾）方法所得的清發酵液作酶液，采用中國天津南開大學研制的孔徑為（5-10）×10^-5毫米轉為氯型或硼酸根型的大孔強堿性苯乙烯系季胺基陰離子交換樹脂為載體，以1公斤干載體作用30-60升清發酵液的比例，在80-180轉/分攪拌下，吸附清發酵液中的游離葡萄糖異構酶，則可得到本發明所述的固定化葡萄糖異構酶。