[其他]由原生質體再生稻株的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 101986000003448
• 申請日: 1986-05-21
• 公開（公告）號: CN86103448B
• 公開（公告）日: 1988-06-29
• 發(fā)明（設計）人: 藤村達人;櫻井基;赤木宏守;根岸友子;広瀨晃
• 申請（專利權）人: 三井東壓化學株式會社
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏

由原生質體生成完全的水稻植株的方法。為得到此原生質體，由稻種的坯、盾片或坯根衍生出愈傷組織，在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)愈傷組織以形成易放出原生質體的細胞團。用原生質體釋放酶溶液處理細胞團以得到原生質體。然后將原生質體培養(yǎng)成愈傷組織，再在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)此愈傷組織，再生出整株稻。

本發(fā)明涉及一種用所謂原生質體法形成稻株的方法。更確切地說，本發(fā)明涉及一種由原生質體衍生出愈傷組織，再由它再生出稻株的方法，原生質體則來自于由稻種的胚、盾片或胚根產生的愈傷組織。

原生質體是植物、細菌、真菌之類的除去了細胞壁的細胞。因為原生質體沒有細胞壁，故易于經受人工處理，例如細胞融合、基因控制、以及人為的體細胞突變等。于是，如果能由所處理的原生質體再生出一個完整的植株，則可能獲得一種植物，它具有野生植物所沒有的優(yōu)點。作為發(fā)展這種所謂的原生質體法的第一步，對于所要研究的每個具體的有機體，都必須建立能夠由原生質體再生出完整植株的方法。

對于雙子葉植物，例如煙草，已知有一些方法可用來從原生質體中再生出完整的植株。在這方面常用的方法包括將原生質體埋置在半固態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基中、懸在液體培養(yǎng)基中、或利用喂養(yǎng)細胞培養(yǎng)等各種培養(yǎng)原生質體的方法。但是已經發(fā)現這些方法對于水稻原生質體的培養(yǎng)是無效的，如果用上述常規(guī)方法之一進行水稻原生質體的培養(yǎng)，原生質體不是死掉就是不能生長。

關于水稻原生物體的培養(yǎng)技術已有報導，由缺乏硝酸還原酶的細胞得到的原生質體衍生出愈傷組織（Wakasa et al.，J.plant physiol.117：pp.223-231，1984）。還有報導說，由花粉的愈傷組織得到的原生質體衍生出愈傷組織，從它產生出苗（ohno et al.，Japanese Journal of Breeding35：pp.54-55，1985）。但是還未曾有從水稻原生質體中再生出完整稻株的報導。

另一方面，很多研究者報導過，由水稻的培養(yǎng)細胞再生出完整植株（Nishi et al.，Nature 219：pp.508-509，1968）。但是，這些方法沒有利用原生質體。另外還發(fā)現，用這些方法由具有高度分化能力的細胞很難得到原生質體。而且原生質體難以培養(yǎng)。

于是，如果建立起一種能由原生質體再生出完整水稻植株的方法，關于創(chuàng)造具有優(yōu)異性能的水稻品種的研究就會前進一大步。

因此，本發(fā)明的目的是提供一種能夠由原生質體再生出完整稻株[稻屬作物，例如亞洲稻（Oryza sativa）、非洲稻（Oryza glaberrima）、多年生稻（Oryza perennis）等等]的方法。

在本發(fā)明的方法中，由水稻種子的胚、盾片或胚根中衍生出第一個愈傷組織，然后將其在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，形成易于釋放出原生質的細胞團。此細胞團用釋放原生質的酶溶液處理以形成原生質體。將原生質體培養(yǎng)成第二個愈傷組織，在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再生出完整的植株。

利用本發(fā)明，第一次由原生質體再生出一個完整的稻株（屬于稻屬，例如亞洲稻、非洲稻、多年生稻等等）。