[發明專利]波棱瓜子殼提取物的液相色譜檢測方法

有效

• 申請號: 202010036029.0
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN111208224B
• 公開（公告）日: 2022-10-21
• 發明（設計）人: 汪俊松;陳劍鋒
• 申請（專利權）人: 南京理工大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 南京理工大學專利中心 32203
• 代理人: 劉海霞

本發明公開了一種波棱瓜子殼提取物的液相色譜檢測方法。所述方法以波棱瓜子殼為原料，利用甲醇與水作為流動相，通過在甲醇中添加0.1％的甲酸，調整不同洗脫時間下甲醇與水的比例獲得最佳洗脫條件，獲得液相圖譜。本發明方法簡便、穩定、精密度高以及重現性好。通過本發明的檢測方法，充分地反映波棱瓜子殼中的化學成分信息。本發明建立的波棱瓜子殼提取物的液相分析譜圖對波棱瓜子殼的生產開發具有重要意義。

技術領域

本發明屬于天然藥物化學技術領域，涉及一種波棱瓜子殼提取物的液相色譜檢測方法。

背景技術

波棱瓜(Herpetospermum pedunculosum)，是葫蘆科波棱瓜屬下的一個植物種。波棱瓜是攀緣性的草本植物，莖、枝都比較細長，瓜外表長有溝狀結構。波棱瓜剛生長出來的時候表面長有稀疏的柔毛，最后表面變得十分光滑。波棱瓜是一年生植物，花為單性并且雌雄異株，廣泛分布于中國、尼泊爾和印度的喜馬拉雅山，常見于海拔2000-3500m的路邊和灌木叢中。

波棱瓜子，系葫蘆科植物波棱瓜的干燥成熟的種子，是中國的傳統藏藥，藏語為“Se-Ji-Mei-Duo”，已收載在《中華人民共和國衛生部藥品標準》中。波棱瓜子具有清熱解毒的功效，被廣泛用于治療“赤巴”炎癥(藏藥三大疾病之一)。波棱瓜的用藥歷史相當悠遠，主要應用它入藥的是藏醫和蒙醫。《迪慶藏藥》及《中華本草》記載：“種子味苦，性寒，效銳；能清俯熱、膽熱；治赤巴人臟腑，肝、膽熱癥(肝炎、膽囊炎)，消化不良。”袁海龍等從波棱瓜子的乙醇提取物中分離得到波棱素(herpetin)(袁海龍,李仙義.波棱素化合物及其制法和其藥物組合物與用途:,CN 1305468C[P].2007)，張梅等從波棱瓜子的乙酸乙酯提取物中分離得到波棱酮、去氫雙松柏醇(Dehydrodiconiferyl alcohol)、波棱內酯Ⅰ(Herpetolide A)、波棱內酯Ⅱ(Herpetolide B)等具有藥用價值的活性化合物(ZHANG M,DENG Y,ZHANG H B,et al.Two new coumarins from Herpetospermum caudigerum[J].Cheminform,2010,39(32))。

根據《中國藏藥》和《西藏常用中草藥》記載，用作藏藥“波棱瓜子”的主要部分是波棱瓜的種子，但種皮、花等部位也能夠利用，并且效用和種子差不多。據調研，目前尚未發現有關波棱瓜子殼的入藥說明，其化學成分、藥理毒性等研究尚未有人涉足。在實際生產過程中，成熟的波棱瓜子經過曬干脫殼后即送往下一步加工，波棱瓜的果殼則被丟棄，造成了巨大的浪費。

發明內容

本發明的目的在于提供一種波棱瓜子殼提取物的液相色譜檢測方法。該方法以波棱瓜子殼為原料，利用天然產物化學手段，通過在有機相中添加一定比例的甲酸，使用高效液相色譜建立波棱瓜子殼的液相圖譜，為波棱瓜子殼的產業化利用過程建立質量標準。

實現本發明目的的技術方案如下：

波棱瓜子殼提取物的液相色譜檢測方法，包括以下步驟：

步驟1，將波棱瓜子殼粉碎；將粉碎后的波棱瓜子殼用95％乙醇進行加熱回流提取，獲得醇提物，將波棱瓜子殼醇提物使用乙酸乙酯進行萃取，對萃取液減壓旋蒸，獲得乙酸乙酯萃取物；

步驟2，將波棱瓜子殼乙酸乙酯提取物加入色譜級甲醇中混溶，超聲使其充分溶解后過微孔濾膜進樣；

步驟3，使用高效液相色譜儀，C18色譜柱為分析柱，以添加0.1％甲酸的甲醇為A相，以水為B相，進行梯度洗脫，設置洗脫程序洗脫60min，獲得波棱瓜子殼提取物的指紋圖譜。

優選地，步驟1中，回流提取次數為3次以上，所述的每次回流提取時間為1～3小時，優選為第一次3小時，第二次2小時，第三次1小時。

優選地，步驟2中，所述的微孔濾膜的孔徑為0.5μm。