[發(fā)明專利]增強(qiáng)腺相關(guān)病毒載體功能的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010980343.4
• 申請(qǐng)日: 2006-04-07
• 公開（公告）號(hào): CN112029737A
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·范登伯格;G·高;J·M·威爾森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 賓夕法尼亞大學(xué)托管會(huì)
• 主分類號(hào): C12N7/01
• 分類號(hào): C12N7/01;C12N15/35;C12N5/10;C12N15/864;A61K48/00;A61P31/12;A61P37/00;A61P43/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

1.一種腺相關(guān)病毒(AAV)，包含AAV衣殼和小基因，所述小基因具有AAV反向末端重復(fù)和與調(diào)控序列操作性相連的異源基因，所述調(diào)控序列指導(dǎo)所述異源基因在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，其中，所述AAV衣殼包含AAV vp1蛋白、AAV vp2蛋白和AAV vp3蛋白，所述AAV vp1蛋白具有i)SEQ ID NO:4(AAVrh46)中氨基酸1至738組成且具有D41N修飾的序列，或ii)與SEQ IDNO:4中氨基酸1至738組成且殘基41為N(D41N)的序列至少95％相同的序列。

2.一種腺相關(guān)病毒(AAV)，包含AAV衣殼和小基因，所述小基因具有AAV反向末端重復(fù)和與調(diào)控序列操作性相連的異源基因，所述調(diào)控序列指導(dǎo)所述異源基因在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，其中，所述AAV衣殼包含AAV vp1蛋白、AAV vp2蛋白和AAV vp3蛋白，所述AAV vp1蛋白具有i)SEQ ID NO:4(AAVrh46)中氨基酸1至738組成且具有G135P修飾的序列，或ii)與SEQ IDNO:4中氨基酸1至738組成且殘基135為P(G135P)的序列至少95％相同的序列。

3.一種腺相關(guān)病毒(AAV)，包含AAV衣殼和小基因，所述小基因具有AAV反向末端重復(fù)和與調(diào)控序列操作性相連的異源基因，所述調(diào)控序列指導(dǎo)所述異源基因在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，其中，所述AAV衣殼包含AAV vp1蛋白、AAV vp2蛋白和AAV vp3蛋白，所述AAV vp1蛋白具有i)SEQ ID NO:4(AAVrh46)中氨基酸1至738組成且具有A136V修飾的序列，或ii)與SEQ IDNO:4中氨基酸1至738組成且殘基136為V(A136V)的序列至少95％相同的序列。

4.如權(quán)利要求1所述的AAV，其中，所述AAV反向末端重復(fù)來(lái)自與提供所述衣殼蛋白的AAV不同的AAV。

5.一種組合物，包含如權(quán)利要求1所述的AAV和生理相容載體。

6.如權(quán)利要求1所述的AAV，其中，所述異源基因編碼鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶、精氨基琥珀酸合成酶、精氨基琥珀酸裂合酶、精氨酸酶、延胡索酰乙酰乙酸水解酶、氨甲酰磷酸合成酶I、苯丙氨酸羥化酶、α-1抗胰蛋白酶、葡萄糖-6-磷酸酶、膽色素原脫氨酶、胱硫醚β-合成酶、支鏈酮酸脫羧酶、異戊酰-CoA脫氫酶、丙酰-CoA羧化酶、甲基丙二酰CoA變位酶、戊二酰-CoA脫氫酶(GCDH)、β-葡糖苷酶、丙酮酸羧酸鹽、肝磷酸化酶、磷酸化酶激酶、β-葡糖醛酸糖苷酶(GUSB)、甘氨酸脫羧酶、低密度脂蛋白(LDL)受體、高密度脂蛋白(HDL)受體、極低密度脂蛋白(VLDL)受體、清除受體、糖皮質(zhì)激素受體、雌激素受體、維生素D受體、核受體、囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白(CFTR)序列、因子IX或其變體、因子VIII或其變體、抗肌萎縮蛋白基因產(chǎn)物或免疫球蛋白。

7.如權(quán)利要求6所述的AAV，其中，所述抗肌萎縮蛋白基因產(chǎn)物是小-抗肌萎縮蛋或微-抗肌萎縮蛋白。

8.如權(quán)利要求6所述的AAV，其中，所述免疫球蛋白包括IgG，IgM，IgA，IgD，IgE，嵌合免疫球蛋白，人源化抗體和/或單鏈抗體。

9.一種重組核酸分子，其編碼權(quán)利要求1中所述的AAV vp1蛋白。

10.一種培養(yǎng)的宿主細(xì)胞，含有權(quán)利要求9所述的核酸分子。

11.如權(quán)利要求10所述的培養(yǎng)的宿主細(xì)胞，還包含rep基因。

12.如權(quán)利要求10所述的培養(yǎng)的宿主細(xì)胞，其中，所述重組核酸分子是質(zhì)粒。

13.如權(quán)利要求2所述的AAV，其中，所述AAV反向末端重復(fù)來(lái)自與提供所述衣殼蛋白的AAV不同的AAV。