[發明專利]基因TPS2在檢測金針菇源性成分中的應用

在審

• 申請號: 202110333643.8
• 申請日: 2021-03-29
• 公開（公告）號: CN112921113A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 商穎;李玲;魏元苗;劉耀;單露英;鄭實
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 昆明同聚專利代理有限公司 53214
• 代理人: 蘇蕓蕓

本發明公開一種基因TPS2在檢測金針菇源性成分中的應用，基因TPS2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；挑選TPS2基因作為金針菇的檢測內標準基因；可快速、靈敏地檢測食品中的金針菇源性成分，靈敏度高，特異性強，操作簡單、成本低廉，反應結果易于觀察，非常適用于現場實時檢測，對金針菇及其深加工產品進行快速生物源檢測具有良好的發展前景。

技術領域

本發明涉及生物物種鑒定和PCR檢測技術領域，具體的說涉及一種基因TPS2在檢測金針菇源性成分中的應用。

背景技術

金針菇（Flammulina velutipes）是中國最早進行人工栽培的食用菌之一，中國已近成為世界上金針菇產量和出口量最多的國家。目前金針菇的生產用菌種比較混亂，異名同種和異種同名的現象在生產栽培上非常普遍，這不僅對實際生產中的規范化菌種管理造成了嚴重影響，而且對金針菇的種性鑒定、品種審定與認定、良種選育等基礎科研及相關產業技術體系建立產生了明顯的制約作用。

隨著金針菇進行深加工產品日益增多，摻偽造假現象也日趨嚴重。此外，由金針菇冒充其他昂貴野生菌的現象也時有發生。傳統的依賴形態學的檢測方法存在著一定的局限性，隨著現代分子生物技術在食品領域的廣泛應用，使用分子生物技術對金針菇及其深加工產品進行快速生物源檢測具有良好的發展前景。

目前，內標準基因已被廣泛地用于鑒別食品摻假，但如何篩選出合適的內標準基因顯得尤為重要。rDNA-ITS (Internal Transcribed Spacers) 方法是目前采用較多的野生菌菌種鑒定方法。盡管DNA條形碼技術在物種分類鑒定、真菌及植物種質資源研究中取得一定的成果，但是仍然存在缺點和局限性。相比之下，基于內標準基因的檢測技術更加方便經濟，目前，對于內標準基因的開發與研究主要集中在農作物上，比如小麥、油菜、大豆、棉花、玉米、水稻等，其內標準基因已被廣泛應用于成分來源的鑒別和分析中。而金針菇的內標準基因尚未見到相關報道，為了建立高效便利檢測金針菇的方法，有必要對金針菇的內標準基因進行開發。

發明內容

本發明目的是提供基因TPS2在檢測金針菇源性成分中的應用，以基因TPS2作為內標基因，該內標基因TPS2在金針菇源性成分鑒定中的應用，基因TPS2的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。

本發明還提供一種用于檢測金針菇源性成分的試劑盒，以基因TPS2為靶基因建立的試劑盒，包括擴增基因TPS2的特異性引物，采用PCR方法檢測內標基因TPS2，特異性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；試劑盒還包括擴增用常規試劑。

本發明確定的用于檢測金針菇源成分的基因TPS2，設計了用于檢測該基因的定性PCR和定量PCR的引物作為試劑盒，建立了檢測金針菇源性成分的相應PCR方法，該方法費時少，特異性好，靈敏度高，操作簡單，不需要專業人員操作，結果易于觀察，非常適于基層食品監督檢驗使用。

附圖說明