[其他]制備魚生長激素的方法

無效

• 申請號: 85103198
• 申請日: 1985-04-25
• 公開（公告）號: CN85103198B
• 公開（公告）日: 1988-03-16
• 發明（設計）人: 川內浩司;山口和夫;白幡公勝
• 申請（專利權）人: 協和發酵工業株式會社
• 主分類號: A61K37/36
• 分類號: A61K37/36
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏,劉元金

1、制備一種新穎的魚生長激素的方法，該魚生長激素屬于一種促進魚生長的多肽，并且具有下列理化性質：纈纈纈

（Ⅰ）氨基酸的組成：

氨基酸鮭魚的生長激素

天冬氨酸28.0

蘇氨酸6.8

絲氨酸11.7

谷氨酸22.5

脯氨酸3.7

甘氨酸7.3

丙氨酸6.6

半胱氨酸3.3

纈氨酸10.7

蛋氨酸2.7

異亮氨酸10.6

亮氨酸28.6

酪氨酸6.8

苯丙氨酸6.8

色氨酸1.0

組氨酸4.2

賴氨酸12.6

精氨酸8.6

其中全部數值均以每摩爾的氨基酸殘基數計，而將每摩爾色氨酸的殘基數定為1與各值比較，

（Ⅱ）在N-端的33個氨基酸和在C-端的23個氨基酸的順序如下：

N-端：H₂N-異亮氨酸-谷氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺-精氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-天冬酰胺-異亮氨酸-丙氨酸-纈氨酸-絲氨酸-精氨酸-纈氨酸-谷氨酰胺-組氨酸-亮氨酸-組氨酸-亮氨酸-亮氨酸-丙氨酸-谷氨酰胺-賴氨酸-蛋氨酸-苯丙氨酸-天冬酰胺-天冬氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-蘇氨酸-亮氨酸-亮氨酸-

C-端：-蛋氨酸-組氨酸-賴氨酸-纈氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-酪氨酸-亮氨酸-蘇氨酸-纈氨酸-丙氨酸-賴氨酸-半胱氨酸-精氨酸-賴氨酸-絲氨酸-亮氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬酰胺-半胱氨酸-蘇氨酸-亮氨酸-OH;

（Ⅲ）分子量：大約22，000;

（Ⅳ）等電點：5.6-5.7;以及（Ⅴ）可溶于堿性水溶液且難溶于或不溶于中性和酸性水溶液，

該方法的特征在于用丙酮提取大馬哈魚的腦下腺，該提取法包括下列步驟：

-將35%濃鹽酸和丙酮（10∶90～90∶10）的混合溶液加到腦下腺中，并用勻漿器在500～2000轉/分下使腦下腺勻漿5～10分鐘，

-加入同樣的鹽酸和丙酮的混合溶液進行攪拌，并將該混合物在-5到5℃的冷卻條件下離心10～60分鐘，

-移去上清液并且將50～90%的含水丙酮加入沉淀物中，

-在冷卻條件下攪拌后離心該混合物，

-將得到的沉淀用水懸浮，并用飽和的氫氧化鈣水溶液將該懸浮液的pH值調至9-11之間，

-在冷卻條件下攪拌后離心該懸浮液，

-使上清液對水透析并凍干得到粉末，

-用水懸浮該粉末，并用NaOH水溶液將該懸浮液的pH值調至5～7之間。

-用離心分離除去不溶性物質，并用鹽酸將上清液的pH值調至5～6之間，

-用離心分離回收生成的沉淀物，

-將沉淀物溶解于醋酸銨的水溶液（pH8-10，0.05-0.5M）中，并進行葡聚糖凝膠層析，

-用同樣的醋酸銨水溶液進行平衡和洗脫，

-合并活性組分并且凍干得到白色粉末，

-將該白色粉末進行高壓液相層析作為最后純化，以及

-合并活性組分并且凍干以得到白色粉末狀的生長激素。