[其他]制備活的純化的MAREK氏病疫菌的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 85103413
• 申請日: 1985-05-23
• 公開（公告）號: CN85103413A
• 公開（公告）日: 1986-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 哥本·弗佩德·波爾
• 申請（專利權(quán)）人: 中央俄根尼斯肯蒂格研究所
• 主分類號: A61K39/255
• 分類號: A61K39/255
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利代理部
• 代理人: 辛敏忠,顧伯棣

MAREK氏病是一種由烏泡疹病毒，MAREK病病毒感染而引起的雞的惡性淋巴增殖疾病。此病毒是于1907年識別出來的，現(xiàn)在它仍然是家禽病毒中危害性最大的一種。

本發(fā)明涉及制備由MAREK氏病病毒（MDV）株CVⅠ-988分化的一種高免疫原性和非致性病毒制劑，特別是一種抗Marek氏病疫菌的方法。此方法的特點是利用屬于烏泡疹病毒血清型-1的Marek氏病毒（MDV），該克隆接種可以保護(hù)用其接種的雞免以后的強(qiáng)毒力和極強(qiáng)毒力的MAREK氏病（MD）病毒變種感染。該克隆是通過屬于烏類泡疹病毒的Marok氏病病毒的傳代和噬斑純化而得到的。用作傳代和噬斑純化起始材料的病毒是具M(jìn)DV????CVⅠ-988特性的病毒，該病毒株是作為通過在細(xì)胞培養(yǎng)物中經(jīng)系列傳代使病毒減弱的低毒培養(yǎng)物從健康的實試室用雞身上得到的。（Rispens等人in????Avian????Diseases????16，108-125頁，126-138頁，1972年）。在烏類細(xì)胞培養(yǎng)約35代后得到的病毒制劑成功用作制造抗Marek氏病（MD）的雞的疫苗。開始病毒性減弱是在鴨胚成纖維細(xì)胞（DEF）中進(jìn)行。然而在無特殊病原體（SPF）感染條件下，鴨很難存在。這就需要對每批產(chǎn)品進(jìn)行廣泛的試驗，以保證其沒有對烏類有致病性的微生物，在SPF條件下，雞的存養(yǎng)問題較少。再者，因為它們不能將MD疫苗引入與之無關(guān)的動物種屬的細(xì)胞內(nèi)，故一般選用雞細(xì)胞。因此，在1967-1968年間，即已將MDV????CVⅠ-988病毒株在雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）中培養(yǎng)，且MDV????CVⅠ-988疫苗的制造者們亦已轉(zhuǎn)向在CEF中生產(chǎn)該疫苗。

雖然在實踐中，由親代病毒株MDV????CVⅠ-988制取的疫苗已通過肌肉內(nèi)給藥提供了十分滿意的結(jié)果（MAAS????ET????al，World????poultry????Sei????38，163-176頁1982年）當(dāng)用十倍于正常范圍的劑量接種時，在高M(jìn)D敏感性的SPF種的羅得島紅雞（RHODE????ISLAND????RED，RIR）身上，也可能引起MD損害（AVIAN????PATNOLOGy????6，395-403，1977年）。

其它所用的抗MAREK氏病疫苗有：

1.一種基于屬于烏類泡疹病毒血清型3的火雞泡疹病毒（HVT????FC126），（Avian????Diseases????14，P413-429，1970年）和美國專利3，642，574）號專利。美國3，783，098號專利敘述了以無細(xì)胞形式使用這種疫苗的方法。

2.一種由強(qiáng)致病性的MDV病毒株（HPRS-16）經(jīng)減毒得到的疫苗，所用病毒株屬于鳥泡疹病毒血清型1（Journal????of????Geggnal????vizology????4，p557-564，1969年）和美國專利3，674，861號）。

3.一種基于血清型2（SB-1）的MAREK氏病病毒的非致癌性病毒而制得的疫苗（Journal????National????Cancer????Institute????60，p1075-1082，1978年），和美國專利4，160，024號）。這種疫苗一般作為HVT疫苗的混合物使用是有效的。

本發(fā)明提供了一種病毒制劑，特別是一種疫苗，對于家禽，特別是對于雞具有高度免疫厚性并且是非致病性的。

本發(fā)明的病毒制劑是用于屬于烏類泡疹病毒血清型-1的克隆制備的，用這種克隆接種可以使雞免受以后的強(qiáng)毒力和極強(qiáng)毒力MAREK氏病（MD）病毒變種的感染。

根根據(jù)本發(fā)明，這種克隆是通過屬于烏類泡疹病毒血清型-1的Marek氏病病毒在烏類細(xì)胞培養(yǎng)中傳代和噬斑純化，再選擇免疫原性和非致病性，特別是對MD-高敏感的羅得島紅雞免疫原性和非致病的克隆。優(yōu)選的作為起始材料的Marek氏病病毒是MDV????CVⅠ-988。優(yōu)選的克隆是通過在鴨胚成纖維細(xì)胞（DEF）中病毒分離株MDV????CVⅠ-988的系列傳代及在DEP的三十九及四十九代之間經(jīng)六個噬斑純化步驟得到的。這個被稱作MDV????CVⅠ-988克隆C的病毒克隆，因其對RIR雞有抗原性且是非致病的而得以被篩選。