[其他]抗尿激酶單克隆抗體，帶有它的基質，其試驗方法和使用它的生化試驗藥盒

無效

• 申請號: 85107184
• 申請日: 1985-09-27
• 公開（公告）號: CN85107184A
• 公開（公告）日: 1986-09-24
• 發明（設計）人: 馬里·魯薩·諾里;安格勞·科蒂;阿多夫·索芬蒂尼;吉奧瓦尼·卡薩尼;弗朗西斯克·帕蘭蒂
• 申請（專利權）人: 格魯波萊佩蒂特公司
• 主分類號: A61K39/44
• 分類號: A61K39/44;G01N33/53;G01N33/577;B01D15/08
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 顧柏棣,辛敏忠

1、一種單克隆抗體，它具有如下特征：

a)其為IgGl，

b)當基本上按照Tsapis等人(Eur.J.Biochem64，369[1976]所述的方法測定時，其固定入尿激酶的親和常數為(1.42±1.5)×10⁷/1摩爾，

c)它結合高分子量(54000)尿激酶和/或單鏈尿激酶前體，而不與低分子量(33000)尿激酶結合，

d)它結合尿激酶A鏈的18000蛋白水解片段，

e)除了尿激酶以外，它不與血清或尿的活性內肽酶結合。

2、根據權利要求1的尿激酶單克隆抗體，其另外的特征在于：

a）它不損害尿激酶的酶學活性，

b）其等電點約為5.75。

3、根據權利要求1的抗入尿激酶單克隆抗體，其進一步的特征在于，當其與適宜的基質結合時，它能在PH4.5-8.0時，甚至在有0.5摩爾氯化鈉水溶液存在時結合抗原，并在0.5-1摩爾氯化鈉水溶液中于PH3.0-4.0時釋放出所結合的抗體。

4、一種用于純化人尿激酶和/或其單鏈尿激酶前體的免疫吸附劑，其特征在于，它是由權利要求1所述的單克隆抗體與選自瓊脂糖，修飾的和活化的瓊脂糖，交聯葡聚糖，纖維素和羧甲基纖維素的基質相聯接而制得。

5、一種用于純化人尿激酶和/或其單鏈尿激酶前體的免疫吸附劑，其特征在于，它是由權項1所述的單克隆抗體與基質即瓊脂糖相連接而制得。

6、一種根據權項4或5所述的免疫吸附劑，其進一步特征在于，當其用于純化尿激酶的過程時，所獲得的尿激酶具有下述特征：

a）血纖維蛋白溶解值高于130000??Iu/ml，

b）富含高分子量尿激酶和/或其單鏈尿激酶前體，

c）實際上不含低分子量尿激酶，

d）血纖維蛋白溶解活性/酯酶活性比大于2000，

e）實際上沒有促凝血酶原激酶污染物（在濃度為200??Iu/ml時凝血活性為零）。

7、根據權項4或5的免疫吸附劑，其進一步特征在于，當其用于純化單鏈人尿激酶前體時，所獲得人尿激酶前體具有下述性質：

a）它是分子量為50-54000的單鏈蛋白質，

b）它幾乎不具有酰胺基分解活性，

c）它具有高的血纖維蛋白活性，

d）它不被血漿抑制劑滅活，

e）用血纖維蛋白溶酶處理，轉變成雙鏈活性血纖維蛋白溶酶原激活劑。

8、一種從生物源中提純分子量為54000的尿激酶或其單鏈尿激酶前體的方法，其特征在于將生物源或其濃縮物與權項4或5所述的免疫吸附劑在PH4.5-8.0條件下相接觸，以使分子量為5400的尿激酶或其單鏈尿激酶前體選擇性地結合在免疫吸附劑上，用PH6-8的緩沖溶液沖洗，用含有或不含有0.5-1摩爾的氯化鈉水溶液（PH3.0-4.0）的洗脫溶液洗脫，將所結合的抗原從免疫吸附劑上釋放下來。

9、根據權利要求8的方法，其特征在于，抗原與免疫吸附劑的結合，也可以在有濃度高達0.5摩爾的氯化鈉水溶液存在時完成。

10、根據權利要求9所述的方法，其進一步特征在于，所獲的尿激酶產物具有下述性質：

a）它的血纖維蛋白的溶解值高于130000??Iu/ml，

b）它富含有高分子量尿激酶或其單鏈尿激酶前體

c）實際上不含低分子量尿激酶

d）它的血纖維蛋白溶解活性/酯酶分解活性的比值高于2000

e）它實際上沒有促凝血酶原源激酶污染物（在濃度為200??Iu/ml時凝血活性為零）。

11、一種純化人尿激酶或其單鏈尿激酶前體的方法，其特征在于，使用權利要求1或2所述的單克隆抗體進行親和層析。

12、一種純化人尿激酶或其單鏈尿激酶前體的方法，其特征在于，使用權項4或5所述的免疫吸附劑進行親和層析。