[其他]一種發酵液的澄清材料及工藝

無效

• 申請號: 85109584
• 申請日: 1985-12-06
• 公開（公告）號: CN85109584B
• 公開（公告）日: 1988-09-14
• 發明（設計）人: 蘇美昆;李之浩;王其南
• 申請（專利權）人: 江蘇省微生物研究所
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00
• 代理公司: 江蘇省專利服務中心
• 代理人: 沈國安

本發明涉及用于醫學及食品的酶制劑的發酵液固液分離的澄清材料及其工藝。

用發酵法生產酶制劑是生產酶的主要手段之一，為提制食品添加劑酶及醫藥用酶，首先要得到澄清的上清液或壓濾液做精制酶的出發液，但是某些菌種如，枯草桿菌的發酵醪十分粘稠，極難過濾制成清液。以往利用多種凝聚劑或絮凝劑作離心或過濾前的預處理，諸如聚丙烯酰胺、磺化聚苯乙烯、聚谷氨酸、右旋糖酐等（1），以及磷酸氫鈣凝膠（2）。上述各種試劑，有些在經濟上合理的添加量范圍內不能取得滿意的結果;有些在絮凝劑或凝聚劑允許使用的劑量范圍內不能取得理想效果;有些在食品添加劑酶生產過程中不允許使用或至今尚有爭議，凡此種種均使工藝的進展受到影響。

本發明的目的是提出一種新的無毒無害、操作簡便，為食品法所允許，對酶活力無損，而固液分離效果較好，材料來源豐富，經濟上合理，適于工業生產的材料和工藝。

生產α淀粉酶，堿性蛋白酶，中性蛋白酶用細菌發酵，采用農產品直接作為發酵原料的含酶醪液，若按這條工藝發酵通過精制而成為精制酶，則無論后續提煉是采用何種方法，都必須將發酵液先過濾除去菌體、原料殘渣（包括玉米粉、豆并粉等）各種固形雜質。近幾年來處理諸如枯草菌發酵液那樣粘稠的液體，先經凝聚或絮凝后再經壓濾或離心分離得澄清液。目前已可以買到許多牌號的商品凝聚劑與絮凝劑。有天然的如明膠、淀粉、丹寧、基丁質等等;也有人工合成的如聚丙烯酰胺、磺化聚苯乙烯、聚谷氨酸、聚酰胺、聚乙烯亞胺等。無機的凝聚劑有硫酸鋁、三氯化鐵、硫酸亞鐵、堿式氯化鋁等。但要用于發酵含酶醪液，要求無毒、無害、無損酶活力，固液分離效果良好，經濟上合理，則可選用者很少了。

一般絮凝有機物大多采用陽離子型聚丙烯酰胺絮凝劑（3）。為了增強絮凝效果，可配伍適當的無機凝聚劑。但目前國際上聚丙烯酰胺絮凝劑是在監督下使用（4、5、6）。有在枯草桿菌醪液中加入磷酸二鈉-氯化鈣，便可產生磷酸鈣凝膠。它把菌體及不溶性發酵原料的殘渣吸附並包裹著，可以明顯地改善醪液的壓濾速度。但是磷酸鈣凝膠改善發酵液過濾速度特征明顯地受到壓濾醪液自身溫度的影響。若用未經加熱的醪液壓濾濾速仍然太慢，不符合工業過濾的要求（7）。

本發明提供的一種凝固技術，使凝聚顆粒有高度的抗剪切力的能力，無論在生產操作中用氣攪拌或機械攪拌以及加壓力都不會破壞固液分離效果;並要使它的顆粒要達到足夠大的程度，而且其大小的程度和抗剪切力的強度要可隨所加試劑的濃度加以調節。當醪液溫度與PH變化時，抗剪切力的能力和凝聚顆粒的大小不會隨之而改變。這樣在壓濾時所形成的濾餅孔隙率就大，固體的比表面積就小、濾餅多孔、疏松、濾速快，可以滿足工業過濾的要求。

本發明所規定的發酵液固液分離澄清材料，它含有氫氧化鈉、海帶粉、草酸、草酸鈉和氯化鈣，它們的加入是：海帶粉的最終濃度為1%至2%，氫氧化鈉（濃度為0.1%至2%）的加入量是能把海帶粉配制成5%至15%（W/V）的懸濁液，草酸的加入量為可把上述溶液的PH值調至中性，草酸鈉的加入量為最終濃度是0.1%至1%，氯化鈣的加入量為最終濃度是4%至5%。上述海帶粉的最佳粒度為40目至80目。

根據上述成分組成的澄清材料，其中海帶粉起聚集醪液中固形物質的作用，氫氧化鈉使海帶粉成為溶膠狀態;帶酸調節PH值，同時伴生草酸鈉;草酸鈉可使醪液中原有的二價陽離子被充分絡合，勿使醪液中原有的二價陽離子干擾海帶溶膠轉變為凝膠聚集體;氯化鈣是使海帶溶膠轉變為凝膠聚集體的試劑，從而有利于粘稠發酵液的澄清。

本發明的工藝操作是將海帶粉在60℃至80℃的溫度下焙干，磨碎成粉末，加入濃度為0.1%至2%的氫氧化鈉，配制成5%至15%（W/V）的懸濁液，在80℃至100℃熱水浴保溫2小時至8小時后用草酸調節該溶液PH值至中性，再冷卻至室溫（稱為〔1〕液），將〔1〕液和加有草酸鈉的醪液（所加入的草酸鈉量為最終濃度是0.1%至1%）混和成混懸液，配制比例為：醪液∶〔1〕液＝100∶5～40（V/V）。再加入氯化鈣溶液，立即攪拌均勻，放置1至2小時后，用離心或過濾方法澄清。氯化鈣的加入量為10%至15%（V/V）。

實施例一

將海帶粉在60℃至80℃的溫度下焙干，用磨粉機磨碎成粉末，稱取粒度40目的海帶粉1克、2克、3克分別置于燒杯，各加入濃度為1%的氫氧化鈉溶液20毫升，用玻璃棒攪拌，在80℃至100℃的水浴保溫2至8小時，然后加入草酸調PH值至中性，制成濃度為5%10%、15%的三種〔1〕液，備用。