[其他]各種橡膠聚合酶和它們的生產方法及用途

無效

• 申請號: 86102341
• 申請日: 1986-04-08
• 公開（公告）號: CN86102341A
• 公開（公告）日: 1986-10-15
• 發明（設計）人: 約瑟夫·呂漢超;戴維·斯科特·施里夫
• 申請（專利權）人: 固特異輪胎和橡膠公司
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 劉元金

1、本發明特征發現了一種基本上純形式的橡膠聚合酶。

2、根據權利要求1所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述的聚合酶是從三葉膠屬的植物中發現的。

3、根據權利要求1所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述的聚合酶是從三葉膠巴西勒因膠乳中發現的。

4、根據權利要求1所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述的聚合酶是一種單體，分子量大約從36，000至44，000，是用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定的。

5、含有基本上純的多肽的橡膠聚合酶，至少具有一個活性位置。

6、根據權利要求5所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述的多肽，是從三葉膠巴西勒因膠乳中發現的，橡膠聚合酶基本上是同系物。

7、根據權利要求5所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述的多肽，至少有一個活性點，其發酵功能相當于從三葉膠巴西勒因膠乳中找到的橡膠聚合酶的活性。

8、根據權利要求5所述的橡膠聚合酶，其特征在于其中所述至少一個活性點，是從三葉膠巴西勒因膠乳中的橡膠聚合酶的相應位置改變而生成具有增強橡膠聚合酶活性的多肽。

9、一種生產基本上純形式的橡膠聚合酶的方法，包括下述各步驟：

先從含有橡膠聚合酶的三葉膠屬的一種植物中制備化學穩定的膠乳，這種酶可與上述膠乳中的橡膠粒子結合在一起，也可以游離于溶液中;

將上述膠乳溶液中的游離的橡膠聚合酶進行分離;

再將分離后的橡膠聚合酶提純，可以得到基本上純的形式。

10、根據權利要求9，其特征在于其中所述的植物是三葉膠巴西勒因。

11、根據權利要求9，其特征在于其中所述制備穩定膠乳是指將大約1至10體積的，由多羥基化合物、防微生物試劑和緩沖劑組成的穩定溶液，加入到大約一個體積的上述膠乳中。

12、根據權利要求11，其特征在于其中所述穩定溶液可以含有巰基化合物。

13、根據權利要求11，其特征在于其中所述多羥基化合物可以是甘油，山梨糖醇、蔗糖等。

14、根據權利要求11，其特征在于其中所述穩定溶液是由大約10%至80%（重量/體積）的甘油，大約0.001%至1%（重量/體積）的疊氮化鈉，和緩沖劑組成的;溶液的PH值大約從7至12。

15、根據權利要求14，其特征在于其中所述穩定溶液是由50%（重量/體積）的甘油，大約0.3%（重量/體積）的疊氮化鈉和大約0.1M的碳酸氫鈉組成的。

16、根據權利要求15，其特征在于其中所述穩定溶液，還含有大約5mm的半胱氨酸。

17、根據權利要求9，其特征在于其中所述分離是指色譜分離法。

18、根據權利要求17，其特征在于其中所述色譜分離法是指離子交換色譜法。

19、根據權利要求18，其特征在于其中所述離子交換色譜法是指包括用離子交換樹脂與上述膠乳混合的色譜分離方法，上述在溶液中游離的橡膠聚合酶與樹脂結合，生產聚合酶-樹脂絡合物，分離絡合物，然后從絡合物中把橡膠聚合酶取出。

20、根據權利要求19，其特征在于其中所述離子交換樹脂是指陰離子交換樹脂。

21、根據權利要求9，其特征在于其中所述分離是在4℃時進行的。

22、根據權利要求9，其特征在于其中所述提純，包括下述各步驟：

滲析：將上述要分離的橡膠聚合酶制成一種滲析液;

加一種凝膠劑到上述滲析液中，使生成凝膠聚合酶絡合物;

分離：將上述絡合物從上述滲析液中分離出來;

取出：將上述聚合酶從上述絡合物中取出;

將取出的聚合酶進行凝膠過濾色譜分離，可得到基本上純形式的橡膠聚合酶。

23、根據權利要求22，其特征在于包括另一操作步驟：將上述滲析液與一種吸附蛋白質的吸附劑混合，然后再將預先將上述凝膠加到上述滲析液中的上述吸附劑取出。

24、根據權利要求23，其特征在于其中所述吸附劑是指γ-氧化鋁。