[其他]利用DNA重組技術(shù)產(chǎn)生抑制素的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 86103459
• 申請日: 1986-05-05
• 公開（公告）號: CN86103459A
• 公開（公告）日: 1987-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅伯特·格雷戈里·福拉奇;安德魯喬治·斯圖爾特;戴維·馬克·羅伯遜;戴維·莫里茨·德克雷澤
• 申請（專利權(quán)）人: 澳洲生物科技公司;蒙納什大學(xué);享利王子醫(yī)院;圣大森特醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;A61K37/43;A61K49/02
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏

1、一個多核苷酸序列，包括一個對抑制素的整個部分，構(gòu)成部分，同類物或前體的氨基酸序列起編碼序列作用的第一多核苷酸序列，一個雜化上述第一序列的多核苷酸序列，一個通過突變，包括單個或多個堿基取代，缺失，插入和逆位，與上述第一序列或雜化序列有關(guān)的多核苷酸序列或一個為多肽的整個部分，構(gòu)成部分，同類物，同系物或前體表達(dá)密碼的多核苷酸序列，此多肽是抑制素或是與此抑制素顯示出類似免疫學(xué)或生物學(xué)活性的多肽。

2、權(quán)利要求1中的多核苷酸序列，以真正純的形式存在。

3、權(quán)利要求1或2中的多核苷酸序列，它為抑制素的43KD亞基表達(dá)密碼。

4、權(quán)利要求1或2中的多核苷酸序列，它為抑制素的20KD亞基編碼。

5、權(quán)利要求1或2中的多核苷酸序列，它為抑制素的15KD亞基編碼。

6、權(quán)利要求1到4中的任意一個多核苷酸序列，其中所說的抑制素選自於人或牛的抑制素。

7、權(quán)利要求1或2中的多核苷酸序列，它為圖5中的-60到166氨基酸序列，圖5中的-10到166氨基酸序列，圖7中的1到166氨基酸序列，圖7中的-61到171氨基酸序列，圖7中的-10到171氨基酸序列，圖7中的1到171氨基酸序列或其他的生物等同物編碼。

8、一個DNA序列，實際如同前面有關(guān)圖5，6，7和8中任意一個附圖所述。

9、一個選擇為蛋白質(zhì)的整個部分，構(gòu)成部分或前體編碼的RNA或DNA序列的方法，所說的蛋白質(zhì)是抑制素或是與抑制素顯示出類似免疫或生物活性的蛋白質(zhì)，該方法包括提供一個或多個序列，和決定上述序列中哪一個與一個已知的、為有這樣一種活力的蛋白質(zhì)的整個部分，構(gòu)成部分或前體編碼的DNA或RNA序列雜化;或提供一個抗血清給抑制素或其構(gòu)成部分並鑒定表達(dá)抑制素的構(gòu)成部分或整個部分的宿主-載體組合物。

10、權(quán)利要求9的方法，其中所說的大多數(shù)序列是牛或人的基因組DNA。

11、權(quán)利要求9或權(quán)利要求10的方法，包括下列步驟：

（a）提供許多RNA序列，其中的一個或多個為一個含有抑制素的整個部分，構(gòu)成部分，同類物，同系物或前體的氨基酸序列，或為一個顯示出與上述抑制素類似免疫或生物活性的多肽編碼。

（b）合成與上述RNA序列相對應(yīng)的DNA序列以形成DNA序列文庫。

（c）將上述的DNA序列插入到自主復(fù)制的克隆載體中以形成重組體克隆載體。

（d）用步驟（c）中的重組體克隆載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞。

（e）選擇轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，為抑制素的整個部分，構(gòu)成部分，同類物，同系物或前體或類似的多肽已經(jīng)插入的DNA序列編碼。

（f）鑒定包含在步驟（e）所說的轉(zhuǎn)化宿主的克隆載體中的，已插入的DNA序列。

12、權(quán)利要求11的方法，其中上述的許多RNA序列包括人或牛的RNA序列。

13、選擇一個為蛋白質(zhì)的整個部分，構(gòu)成部分或前體編碼的RNA或DNA序列的方法，所說的蛋白質(zhì)是抑制素或是顯示出與抑制素有類似免疫或生物活性的蛋白質(zhì)，實際上如同前述的實例。

14、一個用于鑒定抑制素RNA或DNA的探查物，它含有一個多核苷酸序列和一個標(biāo)記，這個序列對至少有一部分蛋白質(zhì)抑制素或有其亞基的氨基酸序列，或一種顯示出類似免疫或生物活性的蛋白質(zhì)，或一個與上述序列雜化的序列起編碼序列的作用。

15、權(quán)利要求14的探查物，其中上述的標(biāo)記是一個放射性輻射標(biāo)記。