[其他]生育控制疫苗的制備方法

無效

• 申請號: 86103854
• 申請日: 1986-06-04
• 公開（公告）號: CN86103854A
• 公開（公告）日: 1987-12-16
• 發明（設計）人: 古薩倫·P·塔爾沃
• 申請（專利權）人: 國家免疫學研究所
• 主分類號: A61K39/385
• 分類號: A61K39/385
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 辛敏忠,顧柏棣

此項發明與控制生育的疫苗有關，特別是與生育系統中具有多個決定性抗原的多價疫苗有關，這些抗原與至少一個或多個載體相連。

本發明通過抗體阻斷一種或多種促性腺激素這種主動免疫機制來達到控制生育的目的。垂體促黃體生成激素（LH）和絨毛膜促性腺激素（CG）在靈長目動物的生育調節中起重要的作用。前者對排卵、和甾類物質形成、后者對黃體激素的釋放和甾類物質水平的維持直至轉移到胎盤十分重要。人類的絨毛膜促性腺激素（hc????G）是滋養細胞的一種早期產物，據認為它對妊娠發生和維持十分重要。已證實無論主動和被動免疫法在控制靈長目繁殖生育上均為有效。弗氏佐劑（C.F.A）在免疫工作中已被使用，但在人身上使用尚難以接受。此項發明是一種活性多價疫苗，它在不使用C.F.A的情況下可誘發靈長目動物兩種促性腺激素抗體的形成。本發明的疫苗可導致形成能與完整的hcG分子-它由α和β兩個亞單位組成一發生反應的抗體，以中和其生物活性并在一定程度上減低LH的生物活性。此疫苗產生的抗體與機體組織無交叉反應，其抗體反應是可控的并具有合理的長期性，產生的免疫是可逆的，對人體功能無毒，無禁忌癥而且不會引起其它的過敏問題。

此項發明所用的抗hcG免疫性，在發明者以前已為人所知，特別是發明者較早的加拿大1054937號專利（發表于1979.5.22）及1.057.742號專利（Stevens，發表于1979.7.3）。但是這兩位抗hcG疫苗的研究者使用了基本不同的方法。本發明使用了hcG的β亞單位，而Stevens用的是同一亞單位的37氨基酸的羧端多肽（cTP）。這種“自身”蛋白產生免疫的方式也是不同的。本發明者使用了一種載體，例如破傷風類毒素，而Stevens及其同事最初提倡使用蛋白質的半抗原改良法，后來它們還是選擇了載體的方法。

hcG是一種由α和β兩種亞單位構成的糖蛋白激素。對腦垂體的其它三種激素TSH.LH和FSH來說α亞單位是共同的，而β亞單位提供了這些激素各自的特性。因此僅僅使用hcG的β亞單位作為抗原可減少一些抗體與其它糖蛋白激素發生交叉反應的機會，特別是與TSH和FSH反應的機會。由于雌性免疫系統在正常情況下對hcG是有耐受性的，注射激素將不會產生抗體。免疫將通過改良分子結構產生，這有兩個方法：或在分子上附加半抗原成份，或將分子與一個產生免疫的載體蛋白相連接，因而，前述加拿大第1054937號專利中，使用了βhcG與破傷風類毒素形成化學性連接的疫苗，其免疫作用是有效的。這種疫苗產生的抗體對妊娠激素hcG及破傷風類毒素均有拮抗作用，但對一些其抗體反應太低，以至不能予防受孕發生的“低應答者”對象的有效性則不能肯定。對象中反應的明顯不同（構成不同）表明需要改進疫苗以使其既使不是全部也是大部分對象能產生適當的抗體反應。

本發明試圖提供一種與βhcG-TT疫苗比較，改良的免疫抗原以在哺乳動物中產生較高的hcG抗體，建議使用一種以上的載體，以在對一種既定載體低反應對象中產生良好的抗體反應。

本發明提供了一種制備多價疫苗的方法，該方法有以下幾個步驟：（a）提取生殖系統至少兩種分離抗原，第一種是hcGβ亞單位制劑，第二種是一種精子抗原或一種LH的異種α或β亞單位的制劑，（b）得到至少一種適合對象的載體，（c）上述（a）步驟的至少兩種抗原與（b）步驟至少一種載體，通過下述一組的至少一個步驟而結合（Ⅰ）上述至少兩種分離抗原與同一載體連接形成一個合成結合物，（Ⅱ）上述至少兩個分離抗原分別與上述一個載體連接，形成的結合物再行物理性混合（Ⅲ）上述兩個分離抗原即hcGβ亞單位和上述之異種α亞單位相結合，形成一個退火的合成物，然后再與上述一個載體結合，如果出現多個載體，則（Ⅳ）形成一個至少有一個抗原的多價結合物，這個抗原與至少一個精子抗原和至少一個載體同時連接，（Ⅴ）形成上述抗原與一個上述載體連接的結合物，如果需要，（d）將兩個或多個自（Ⅰ）到（Ⅴ）的結合產物相連接。