[其他]雜多糖S-657

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 86104449
• 申請日: 1986-06-27
• 公開（公告）號: CN86104449A
• 公開（公告）日: 1987-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杰里·A·派克;蘇姍娜·M·斯延伯根;喬治·T·維德
• 申請（專利權(quán)）人: 麥克公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;//
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 李雒英

本發(fā)明是關(guān)于微生物多糖類方面的。人們知道，在這個(gè)方面某些微生物具有一個(gè)共同特征，那就是能產(chǎn)生細(xì)胞外的雜多糖。雜多糖通常為高分子量的線性碳水化合物多聚體，含有兩種或兩種以上類型的單糖，這些單糖以重復(fù)單位互相聚合在一起。

大部分雜多糖的用處在于它們能夠改變水溶液中的粘度和液流學(xué)性質(zhì)。此外，雜多糖還有相關(guān)的次要功能，如乳化作用，懸浮，穩(wěn)定，及絮凝作用等等。參見示例，美國專利4，326，052，4，401，760。

雜多糖被廣泛用于食品，鉆井，農(nóng)業(yè)及各種各樣其它工業(yè)應(yīng)用上。近幾十年來，商業(yè)上對這些水溶性膠的需求大大增加。另外，新的工業(yè)技求產(chǎn)生對新的物理性質(zhì)的雜多糖的需要。所以，對不同功能性范圍的雜多糖的需要，結(jié)合商業(yè)上的需求，都已明顯地說明發(fā)展新的、有不同物理特性的新型雜多糖是十分需要的。

因而，本發(fā)明的一個(gè)目的就是提供一種新型雜多糖，該雜多糖是由一種微生物野油菜黃單胞菌的新菌株所產(chǎn)生的。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備這種新型雜多糖的方法。還有一個(gè)目的是提供生產(chǎn)這種新化合物的微生物。另外，本發(fā)明還提供配制含有這種新型雜多糖的配方。本項(xiàng)發(fā)明的所有這些目的將在下面詳盡說明。

現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，野油菜黃單胞菌一種新菌株通過在某一選擇性碳源上作用可產(chǎn)生一種新型雜多糖。該雜多糖主要由碳水化合物，和大約12%蛋白以及7%酰基（以0-乙酰基計(jì)算）所組成。碳水化合物部分含有重量比為19%的葡萄糖醛酸及中性糖-鼠李糖和葡萄糖，這兩種糖的摩爾分子數(shù)比例約為2∶1。這個(gè)新型化合物是通過野油菜黃單胞菌的新菌株在合適液體營養(yǎng)培養(yǎng)基中有氧發(fā)酵而制備的。根據(jù)布達(dá)佩斯條約，這種微生物菌株的生物純培養(yǎng)于1985年6月19日，按注冊號ATCC????53159保存在美國馬里蘭州，洛克菲勒的美國菌種保藏中心。這種雜多糖，這里命名為雜多糖S-657，在水溶液系統(tǒng)中具有我們期望的那些特性，尤其適用于配制油井處理液體。

本發(fā)明的這種新型微生物是從一種采自美國加州尤里卡地區(qū)附近沼澤地的藻類樣品中分離得到的。經(jīng)過30℃溫度下培養(yǎng)4天，從YM瓊脂平板上挑選出這種呈膠狀菌落的微生物，然后這種分離物在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)一步純化培養(yǎng)。

取在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的分離株接種到種子三角瓶中培養(yǎng)。然后再取三角瓶中培養(yǎng)物用作種子接種到另一個(gè)含有以水解淀粉作為碳源的營養(yǎng)培養(yǎng)基的三角瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)三角瓶中含有一種粘液，加入異丙醇后，可見一種纖維狀物質(zhì)沉淀下來。另一個(gè)三角瓶種子培養(yǎng)，用來測定各種營養(yǎng)培養(yǎng)基對膠產(chǎn)量的影響，以及測定這種微生物生長用最佳培養(yǎng)基和發(fā)酵條件。

雜多糖S-657是在控制的條件下，接種ATCC????53159菌株培養(yǎng)物，通過在營養(yǎng)培養(yǎng)液中有氧發(fā)酵而產(chǎn)生的。所用培養(yǎng)基含有可同化的碳源，氮源和無機(jī)鹽。

一般來說，碳水化合物（例如葡萄糖，果糖，麥芽糖，蔗糖，木糖，乳糖等）在營養(yǎng)培養(yǎng)基中能被單獨(dú)或聯(lián)合在一起用作可同化的碳源。培養(yǎng)基中所用的一種或多種碳源的確切數(shù)量部分程度上取決于培養(yǎng)基中所含的其它成分。但是總的來說，所用碳水化合物量通常在培養(yǎng)基重量的2%～5%之間。這些碳源在培養(yǎng)基中能被單獨(dú)或聯(lián)合使用。

總的來說，許多蛋白質(zhì)性物質(zhì)可被用作發(fā)醇過程的氮源。合適的氮源包括如酵母水解物，粗酵母，大豆粉，棉籽粉，酪蛋白水解物，玉米漿，蒸餾酒廠廢液濃縮物，蕃茄醬等等，這些氮源既可單獨(dú)也可聯(lián)合使用;用量范圍通常為液體培養(yǎng)基重量的0.05%～0.2%。

那些可摻入培養(yǎng)基中的營養(yǎng)無機(jī)鹽常為一些鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鈣鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、鹽酸鹽、碳酸鹽及其類似的離子。也包括一些微量的金屬元素如鈷、錳、鐵、鎂。

提請注意的是，我們這里所列舉的培養(yǎng)基僅僅是說明可被使用的培養(yǎng)基種類很多，而不是想就限制在這些。

用一種更替的培養(yǎng)基，S-657菌株可在低鈣條件下生長，也即在去離子水或一些實(shí)際上不含鈣離子的其它水溶液系統(tǒng)中。（也即最終發(fā)酵培養(yǎng)基中每1%膠液中含有鈣離子濃度小于4ppm）。

發(fā)酵在溫度25°～35℃范圍內(nèi)進(jìn)行，然而為獲得最佳結(jié)果，常在溫度28°～32℃下進(jìn)行發(fā)酵，用以培養(yǎng)ATCC53159菌株和生產(chǎn)雜多糖S-657，培養(yǎng)基的PH值可在6-8范圍內(nèi)變動(dòng)。

盡管雜多糖S-657用表面培養(yǎng)和浸沒培養(yǎng)都能產(chǎn)生，但通常都選用在浸沒狀態(tài)下進(jìn)行發(fā)酵。

小規(guī)模的發(fā)酵可以很方便地將培養(yǎng)物接種入合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中進(jìn)行，轉(zhuǎn)到生產(chǎn)培養(yǎng)基中后，就讓發(fā)酵在大約30℃恒定溫度下，在搖床上進(jìn)行數(shù)天。