[其他]用風化煤制取腐植酸-微生物蛋白飼料的方法及其產品

無效

• 申請號: 86105680
• 申請日: 1986-07-26
• 公開（公告）號: CN86105680A
• 公開（公告）日: 1987-02-11
• 發明（設計）人: 廖錦材
• 申請（專利權）人: 江西省樟樹農業學校
• 主分類號: A23K1/00
• 分類號: A23K1/00;C12N1/16
• 代理公司: 江西省專利服務中心
• 代理人: 馬向紅

本發明是關于利用風化煤制取腐植酸-微生物蛋白飼料的方法及其產品。

微生物能夠利用土壤腐植酸作為碳源生長繁殖，但利用風化煤中的腐植酸作為碳源培養微生物，生產腐植酸-微生物蛋白飼料，尚未見報道。蘇聯、日本等國用泥煤中的有機質作為微生物的炭源，培養酵母菌，生產單細胞蛋白飼料，其主要方法是加酸在高溫下水解泥煤中的有機質，使其轉化成糖后，用氫氧化鈣等物質中和，再加適當養分培養微生物。用這種方法生產的飼料，含蛋白質多，但產量低，工藝繁瑣，浪費原材料，故成本較高。八十年代初，日本在泥煤中加入適量養分作培養基，培養蘑菇，經過45～55天，采收蘑菇后，將培養基干燥后制成飼料，這種方法簡單，便于推廣，但生長周期長，飼料含蛋白質少，（10%左右）適口性差。另外，我國煤炭生產中，有大量含腐植酸10%以下的風化煤，因其品位過低，大都被廢棄，未加利用。

為此，本發明的目的是提供一種利用風化煤中的腐植酸作為部分碳源，培養微生物，生產周期短，生產工藝簡單，不受陽光、土地等條件限制的制取腐植酸-微生物蛋白飼料的方法以及由此方法制造的產品。

本發明是通過以下方法實現的：以風化煤為原料，用堿溶液提取其中的腐植酸作為部分碳源，并以制酒廢渣（谷殼）的水洗液為另一部分碳源，在堿性條件下，用工業發酵法培養Candida????Lipolytica????47，從而制取出腐植酸-微生物蛋白飼料。

本發明利用風化煤制取腐植酸-微生物蛋白飼料的制取工藝流程如下：

風化煤1份

從風化煤中提取腐植酸 (0.5～2%堿溶液10份)/(煮沸保溫1小時) 取濾液配制培養基并按常規法滅菌→攪拌培養 (130～150轉/分)/(4～5天) 檢驗 (涂片鏡檢)/(克氏定氮法) 濃縮干燥 (70℃以下)/() 產品

從風化煤中提取腐植酸是用10份濃度為0.5～2%的堿溶液與1份含腐植酸10～45%的風化煤混合加熱至沸騰，保溫1小時，風化煤中所含的腐植酸有50～80%溶于堿溶液中，液體呈棕黑色，含碳元素在50%以上。

本發明所使用的菌種培養基為常規的葡萄糖-蛋白胨-酵母汁培養基。

本發明發酵用的培養基的組成成份是：

2.2～2.8%的腐植酸鈉溶液????600～900份

5%的酒糟渣（谷殼）水洗液????100～200份

硫酸銨????6～8份

尿素（分別滅菌后再混合）????4～8份

磷酸氫二鉀????4～7份

酵母汁????1～3份

滅菌前將培養基的pH值調至8～8.5。

本發明使用的菌株是從貯放風化煤殘渣多年的土壤中取樣，經過分離篩選、純化，和3年馴養而得到的Candida????Lipolytica????47，稱為馴養后的解脂假絲酵母菌47號（以下簡稱47號菌）。該菌種保藏在中國微生物保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為0095。

47號菌是一株中溫性的好氣性微生物。其形態特征是：在葡萄糖-酵母汁-蛋白胨液體培養基中，在25℃溫度下培養3天，培養液表面有霉斑，底部有疏松沉淀，細胞呈臘腸形，少數為卵形，其大小為3.1～4.3×17.5～23.4微米，在固體培養基上，菌落表面呈粉粒狀，黃色、有粗皺褶，不易挑起，不易老化，邊緣由圓齒狀轉為圓形，經過7天培養后，47號菌的菌落直徑由2.5毫米擴展到5～7.5毫米，它具有前期生長慢，后期生長快的特點，在加蓋玻片的馬鈴薯培養基上，可看到真菌絲和假絲酵母型的假菌絲。

47號菌的主要生理特性是：不同化硝酸鉀，能同化葡萄糖、丙三醇、乙醇、半乳糖、乳糖、蔗糖、但不發酵。

47、號菌對碳源的適應性強，在無碳源的瓊脂培養基中能生長。在液體培養基中，解脂假絲酵母菌不同化的碳源如：麥芽糖、木糖、D-樹膠醛糖、棉子糖等，經過4天以上的培養后，也能逐漸被47號菌同化，在pH值為9的堿性條件下，47號菌能夠生長。該菌經急性毒性試驗，按急性毒性分級屬無毒。

47號菌在含腐植酸和酒糟渣（谷殼）的水洗液為碳源的培養液中生長良好，菌數增多，培養基中的腐植酸被降解，碳元素減少，腐植酸中的基團發生變化，羧基減少。