[其他]霉病霉素的生產方法

無效

• 申請號: 86106265
• 申請日: 1986-08-20
• 公開（公告）號: CN86106265A
• 公開（公告）日: 1987-08-12
• 發明（設計）人: 沢田秀和
• 申請（專利權）人: 武田藥品工業株式會社
• 主分類號: C12P19/58
• 分類號: C12P19/58;//
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 王巍

本發明與生產霉病霉素的發酵方法有關。

霉病霉素是一具有結構式〔Ⅰ〕的化合物;通過培養屬于鏈輪絲菌

屬產霉病霉素的菌株，它作為抗菌素首次被發現并命名為“抗菌素B-98891”。我們把注意力集中在它的活性上，特別是它作為多種植物的一種預防和治療白粉病藥或作為殺螨劑的作用。因此，希望提高霉病霉素的產量，包括在至少含3毫摩爾（毫摩爾/升）N-甲基化合物培養基上或含5-羥甲基胞嘧啶的培養基上培養產霉病霉素的菌株的發酵方法。〔U.S.P.4007267;U.S.P.4334022;U.S.P.4296107;英國專利號1507193;“抗菌素雜志”31卷，6期511-518頁，519-524頁（1978）;“殺蟲劑科學雜志”4卷3期，349-353頁（1979）;“四面體化學”37卷，1317-1327頁（1981）;等等〕。

然而，就目前所知的生產霉病霉素的發酵方法，所采用的產霉病霉素菌株生產霉病霉素的能力是有限的，因而通過改進培養基中含有的物質來提高霉病霉素的產率也是限制的，因此這些方法已不能滿足工業化大規模地生產霉病霉素的需要。

本項發明的發明者經過對提高菌株產霉病霉素能力勤奮研究，結果發現;當把產霉病霉素的菌株對具有結構式

〔Ⅱ〕的絲氨酸氧肟酸鹽或對具有結構式

〔Ⅲ〕的刀豆氨酸有抗性時，即便使用普通培養基，菌株生產霉病霉素的能力也得到意想不到的提高，從而使霉病霉素的生產效率變得更高。根據這一發現，完成了本項發明。

更準確地說，本發明是關于：

（1）一種生產霉病霉素的方法，其特征在于通過在培養基上培養屬于鏈輪絲菌屬，產霉病霉素的菌株，由于此菌株抗培養基中的絲氨酸氧肟酸鹽或刀豆氨酸，從而引起所說菌株合成和積累霉病霉素，并從最后培養物液中回收霉病霉素。

（2）上述申請專利（1）所述的生產霉病霉素的方法，其特征在于培養基中至少含有3毫摩爾的N-甲基化合物。

（3）申請專利（1）或（2）所述的生產霉病霉素的方法，其特征在于培養基中含有5-羥甲基胞嘧啶。

（4）裂生鏈輪絲菌（Streptoverticillium????rimofaciens）能抗絲氨酸氧肟酸鹽或刀豆氨酸并能產生霉病霉素。

在本發明制備霉病霉素的方法中，應用的是屬于鏈輪絲菌屬，有抗絲氨酸氧肟酸鹽或刀豆氨酸特性的產霉病霉素的菌株（這里或以后稱“本發明菌株”）。舉例來說，本發明菌株有如下特性：

〔1〕形態學特性：

在各種不同的常規培養基上，本發明菌株形成氣生菌絲，呈輪狀具二級輪枝。在合成瓊脂培養基如，葡萄糖、天冬酰胺瓊脂上雖然很少但也能發現孢子絲環和鉤狀孢子絲。孢子形狀為卵形到園筒形，大小為0.6～0.8×0.7～1.3微米。一般孢子產生呈鏈狀，含3到16個，每個孢子表面光滑或瘤狀。在常規培養基上，沒有觀察到孢子囊、鞭毛、菌核等等。

〔2〕培養特性：

本發明菌株的培養特性如表1所示。如無特殊說明，描述的是在28℃下經21天培養后的結果。表中用括號（）表明的顏色名稱是根據《色譜手冊》，第4版，Container????Corporation????of????America。

〔3〕生理特性：

（1）生長溫度范圍

在15～38℃范圍內生長，更好地生長和產生氣生菌絲的溫度為28～36℃。

（2）明膠液化（24℃培養28天）

不液化。

（3）淀粉水解：陽性

（4）硝酸鹽還原：在細菌硝酸鹽培養液（ISP-No.8）和查氏培養液（Czapek′s????solution）中陰性。

（5）脫脂乳凝固反應：陽性

蛋白胨化：陽性

（6）黑色素的產生：

陽性（蛋白胨、酵母液、鐵離子瓊脂培養基）

陰性（酪氨酸瓊脂培養基）

（7）碳源的利用（在Pridham·Gottlieb瓊脂培養基上）

ⅰ）利用相當好的碳源：

肌醇、D-半乳糖、D-葡萄糖、麥芽糖、D-甘露糖、淀粉、甘油、醋酸鈉、琥珀酸鈉、檸檬酸鈉。

ⅱ）一般利用的碳源：

D-果糖、海藻糖。

ⅲ）不利用的碳源：

赤蘚醇、核糖醇、D-山梨醇、D-甘露醇、半乳糖醇、D-木糖、L-阿拉伯糖、L-山梨糖、鼠李糖、蔗糖、乳糖、蜜二糖、棉子糖、水楊苷、七葉苷、菊粉。

（8）在蛋白質培養基上的色素生成：弱