[其他]雜交瘤細胞系及其產生的抗人多能粒細胞集落刺激因子單克隆抗體

無效

• 申請號: 86107666
• 申請日: 1986-12-08
• 公開（公告）號: CN86107666A
• 公開（公告）日: 1987-09-30
• 發明（設計）人: 戴維·張;布魯斯·阿特羅克
• 申請（專利權）人: 柯瑞英-艾格公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;A61K39/395;G01N33/53;G01N33/577
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 王巍

一般地說，本發明涉及在分離和定量檢測生物性液體中造血生長因子的免疫學技術中所應用的材料和方法。具體地說，就是包括由新的雜交瘤細胞系（以A.T.C.C.HB-8957，A.T.C.C.HB-8958，A.T.C.C.HB-8959，A.T.C.C.HB-8960，A.T.C.C.HB-8961和A.T.C.C.HB-8962為例）產生的、能與造血生長因子起特異性反應的單克隆抗體，以及應用這些抗體在親和純化技術中分離造血生長因子，檢測造血生長因子和應用免疫學技術研究這些生長因子。更明確地說，本發明涉及與天然的和重組的人多能粒細胞集落刺激因子（hpG-CSF）特異性反應的單克隆抗體。

人的成血（造血）系統負責各種白細胞（包括中性白細胞，巨噬細胞及嗜堿細胞/肥大細胞），紅細胞和凝血形成細胞（巨核細胞/血小板）的更新。據估計，一般男性成人的造血系統每年生4.5×10¹¹左右的粒細胞和紅細胞，這相當于每年將全部體重更新一次。Dexter等，BioEssays，2，154-158（1985）。

據信，小量祖始“干細胞”向各種血細胞系的分化以及這些血細胞系驚人的增殖和最終分化成為成熟的血細胞都是由少量的特定造血生長因子所負責。因為造血生長因子僅以極微量的形式存在，迄今為止檢測與鑒別這些因子所應用的一套方法，都僅是根據不同因子對人工培養細胞的不同刺激效應來區分它們。結果，創造出大量的名稱來命名實際上數目很少的因子。由此造成的混亂可從下面的例子中窺見一斑：IL-3（白細胞介素3），BPA（多集落促發活性），multi-CSF（多集落刺激因子），HCGF（造血細胞生長因子），MCGF（肥大細胞生長因子）和PSF（P細胞刺激因子）等，目前認為這些皆適用于一種鼠類造血生長因子的縮寫詞。Metcalf，Science，229，16-22（1985）。

遺傳重組技術的應用已從這種混亂中獲得某些條理。例如，刺激產生紅細胞的人紅細胞生成素的氨基酸和脫氧核糖核酸的順序已被獲得（見Lin，PCT公布的85/02610號申請書1985年6月20日公布）。重組方法也已被用于分離人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）和人巨噬細胞特異性集落刺激因子（CSF-1）的互補脫氧核糖核酸（見Lee等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.82，4360-4364（1985）;Wong等，Science，228，810-814（1985）和Kowasaki等，Science，230，291-296（1985）。

一個稱為人多能集落刺激因子（hpcsf）或多能生成素（pluripoietin）的人造血生長因子已被證明存在于命名為5637的人膀胱癌細胞系的培養基中，該細胞系在一些限制性條件下寄存在馬里蘭州羅克維爾的美國典型培養物收集中心（American????Type????Culture????Collection），貯存號為HTB-9。據報告從該細胞系純化的人多能集落刺激因子在用人骨髓原祖細胞所進行的測定中刺激了多能祖始細胞的增殖和分化，最終導致所有主要類型血細胞的產生。Welte等，Proc.Natl.Acad.Sci（USA），82，1526-1530（1985）。

初步研究表明在人粒細胞-巨噬細胞集落形成單位試驗的頭7天期間，被鑒定為人多能集落刺激因子，主要具有粒細胞集落刺激活性。