[其他]細菌內毒素測定儀

無效

• 申請號: 86204095
• 申請日: 1986-06-18
• 公開（公告）號: CN86204095U
• 公開（公告）日: 1987-09-16
• 發明（設計）人: 胡冠時
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍陸軍第一五五醫院
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48;G01N33/569
• 代理公司: 河南省專利代理中心
• 代理人: 谷靜芳,馬忠

本實用新型是一種細菌內毒素測定儀，屬于醫藥衛生用分析儀技術領域。該儀器廣泛使用于生物體液，注射用藥品，食品飲料，或其它物品中細菌內毒素含量的測定。

細菌內毒素檢查，簡稱BET，正式文首見于美國國家藥典（US廿版）P888～889頁，該方法是用鱟變形細胞溶解物（LAL，又稱鱟試劑）做為檢測試劑，根據極微量的內毒素便能與LAL試劑顯示出蛋白凝固反應（生成乳白色凝膠）的原理，來進行檢測，具體方法是：在試管中加入一定量的鱟試劑和等體積的供試品緩緩搖至均勻，置于恒溫水浴中，在37±1℃上保溫60±2分鐘后，小心拿出觀察結果，如形成凝膠且反轉180°仍保持完整，則結果為陽性（＋），否則為陰性（－）。這種凝膠極易受到不可逆的破壞，當要形成凝膠時稍有振動，就可出現不可逆破壞，這樣就出現了假陰性結果。由于整個生化反應過程無法直接觀察，往往需要多次預試，測試精度和重演性均受到很大影響，測試誤差很大。

本發明的目的是為了提供一種使用方便，能夠直接觀察生化反應全過程的細菌內毒素測定儀，并可根據觀察到的反應時間計算細菌內毒素的含量。

本實用新型所述的細菌內毒素測定儀是由兩部分組成：一部分是溫度自控系統，一部分是觀察系統。溫度自控系統是這樣實現的：將溫度調節器〔8〕置于適當的位置，控制電加熱管〔11〕工作，使得水浴溫度為37±0.5℃，精確溫度可以從浸于水浴中的溫度計〔10〕和表式溫度計〔9〕讀出；觀察系統是這樣實現的：將試管〔2〕放在試管架〔3〕上，置于水浴中，在試管〔2〕前方的水浴中設置一玻璃管〔4〕，玻璃管〔4〕內壁涂上或貼上帶有一條狹縫的反光膜〔5〕，將燈管〔6〕放入玻璃管〔4〕內，使其發出的光線經反射膜〔5〕反射后，通過狹縫照射在試管〔2〕底端的反應物上，試管〔2〕后方設置一深色背景〔1〕（顏色可以是藍色，可以是黑色，也可以是棕色），儀器的前壁設有一個透明觀察窗〔7〕（其材質可以是玻璃，也可以是透明高分子材料），檢測人員可以通過透明觀察窗〔7〕在深色背景〔1〕的襯托下清晰地直接觀察到生化反應的全過程，反應終點時，反應液由無色透明液體變為乳白色混濁，記錄反應時間，根據反應時間計算出細菌內毒素的含量。（結構如圖）

經研究發現，供試品細菌內毒素的含量Ci與鱟試劑形成凝膠所需時間Ti成冪函數關系：

Ci＝aTi^b……（1）

（1）式中參數a、b對于同一批鱟試劑來說為一常數，可以用標準曲線法求出。

標準曲線：用不含內毒素的蒸餾水將鱟試劑溶介，混勻，精密分取0.1mL澄明液于各試管中，再加入各濃度等級（Ci）的標準內毒素稀釋液0.1mL，輕輕旋搖均勻，放入細菌內毒素測定儀中進行測定，與標準濁度管（用高分子材料制成，濁度、色度酷似剛形成的鱟試劑一細菌內毒素凝膠，可永久保存）比較，判斷反應終點，觀察并記錄各試管形成凝膠的時間Ti。

廈門鱟試劑廠841012－C批號鱟試劑測得的數據如下：

Ci????????10????????5????????2.5????????1.25????????0.625

Ti????????54????????73.67????????93.5????????113.1????????151.68

1????????0.699????????0.398????????0.097????????－0.204

1.732????????1.867????????1.971????????2.054????????2.181

根據上述數據繪制Ci－Ti，LgCi——LgTi????????曲線。

將（1）式兩邊取對數得：

LgCi＝Lga＋bLgTi????????……（2）

（2）式為一線性方程，用選點法，平均值法、最小二乘法或電子計算機均可得出方程式的兩個參數a、b及相關系數γ。

用最小二乘法計算的結果為：

a＝65200????????b＝－2.762????????γ＝－0.99704

由此得出廈門鱟試劑廠841012－C批號的鱟試劑經驗公式為：

Ci＝652000Ti^－2.762……（3）

根據（3）式就可以測試各供試品細菌內毒素的含量。

利用該儀器進行細菌內毒素的檢測，比原方法簡單，方便。能直接觀察到反應時間并計算出細菌內毒素的含量。該儀器結構設計合理，制備工藝簡單，造價低廉，便于推廣應用。