[其他]多微電極電場誘導細胞雜交儀

無效

• 申請號: 86210174
• 申請日: 1986-12-09
• 公開（公告）號: CN86210174U
• 公開（公告）日: 1987-09-23
• 發明（設計）人: 張啟明;張國范;梁偉
• 申請（專利權）人: 遼寧省腫瘤研究所
• 主分類號: C21N15/00
• 分類號: C21N15/00
• 代理公司: 遼寧專利事務所
• 代理人: 王德榮,李宗津

本實用新型是一種細胞雜交儀，利用電場誘導使不同生物體細胞融合雜交。

細胞雜交技術是當代前沿科學領域——生物工程學中細胞工程的重要組成部分，進行動、植物種間或種內不同體細胞的融合雜交，能產生具有新的基因特性的。有生活力的雜種細胞，這對生物育種，生產現代生活需要的多種生物產品的細胞系都具有極其重要的意義。例如：利用人或鼠的骨髓瘤細胞與致敏的人或鼠的B淋巴細胞融合雜交形成能合成抗胎甲球蛋抗癌胚抗原（CEA）、抗ABO血型、抗絨毛膜促性腺激素（HCG）等的單克隆抗體，在腫瘤診斷治療、醫學、法醫學、計劃生育、藥學、生物制品等多種領域廣泛應用。目前體細胞的雜交多采用仙臺病毒、化學物質等作促融劑，融合率很低。近年來出現了電誘導融合體細胞實現雜交的新技術，利用高頻交變電場使待融合的體細胞空間定向排隊，然后用電脈沖擊穿排隊的細胞之間的膜接觸區，使之實現融合。但目前國內外使用的電誘導細胞雜交儀都只裝有一對電極，體細胞的空間定向排列相對較少，融合概率不是很大。另外電源在從建場排隊向擊穿切換時，在一個短暫的時間間隔內，高頻交變電場消失，一部分已空間定向排列好的體細胞又恢復在液體中的無秩序狀態，使體細胞被擊穿融合的概率下降。

本實用新型提出一種電場誘導細胞雜交儀，該儀器采用多個微電極，擴大了電場作用范圍，使體細胞的融合率提高。另外高頻電場直流脈沖儀中采用電容放電產生脈沖，切換時間短，擊穿時機可以手控選擇。

本實用新型由高頻電場直流脈沖儀和裝有電極的雜交池組成（圖1），本實用新型的一個主要特征是在雜交池內有多個微電極，以擴大電場作用范圍。雜交池內的微電極的形狀可以做成多折角形狀（圖2、圖3）、這種微電極是由兩塊金屬薄片相互交錯組成〔1〕，這種形狀可以充分利用雜交池內有限的平面面積，盡量延長微電極的總長度。電極貼附在玻璃片〔3〕上，塑料池壁〔2〕同玻璃片的接觸部用粘合劑粘合。電極最好由黃金制成，這樣的電極表層不產生氧化層，對細胞培養無害。雜交池內的多個微電極也可做成多個相互平行的條形電極〔5〕，利用玻璃離心管〔7〕做為雜交池，可以盡量延長條形電極的長度，將電極貼付在玻璃片〔6〕上，反轉放置在玻璃離心管內，電極的兩根導線〔8〕經管口塞〔9〕處引出。使用這樣的雜交池便于在融合后直接離心，去除電解液，在離心管內對融合細胞進行初步培養，減少已融合細胞的損失。這種多微電極最好也由黃金制成。另一種多微電極的形狀是垂直式的（圖6、圖7），該多微電極〔10〕一側為一金屬絲，另一側為多個垂直放置的并聯金屬絲，這樣多微電極間可以形成多個有效空間定向排列區域，這種多微電極細胞擊穿電壓范圍廣，空間定向排列電壓和直流脈沖擊穿電壓低。該多微電極適于觀察細胞定向排列的示數，該多微電極最好由鉑絲制成因其鋼度較好。

本實用新型的另一特征是：本實用新型中高頻交變電場直流脈沖儀的高壓脈沖 發生及沖擊轉換電路中采用電容器件（圖8），交流電流經降壓，整流后充入電容C₁、C₂、C₃中，一旦手動接通轉換沖擊形狀，電容高速放電，擊穿已經空間定向排列好的細胞，建場和擊穿互不影響，因而融合率高。采用手控方式，借助顯微鏡可以靈活掌握擊穿時機，以取得最優擊穿效果。

本實用新型提出的電場誘導雜交儀較目前使用的雜交儀具有融合率高，適用范圍廣、電路簡單、性能可靠等優點。

圖1為本實用新型雜交儀的結構示意圖。A為高頻電場直流脈沖聯合儀，B為多微電極雜交池。

圖2、圖3分別為多折角式多微電極雜交池的主視圖和俯視圖，圖中1為多微電極，2為塑料雜交池壁，3為玻璃片，4為導線。

圖4、圖5分別為條形多微電極雜交池的主視圖和側視圖。圖中5為電極，6為玻璃片，7為玻璃離心管，8為導線，9為管口塞。

圖6、圖7是垂直式多微電極雜交池的主視圖和俯視圖。圖中10為電極，11為塑料池壁，12為玻璃片，13為導線。

圖8為高壓脈沖發生電路和沖擊開關電路的電路圖。

實施例1：