[其他]傷口治療

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 87101250
• 申請(qǐng)日: 1987-11-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN87101250A
• 公開(kāi)（公告）日: 1988-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 哈里·N·安東尼亞迪斯;雷·C·威廉斯;塞繆爾·E·林奇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 分子生物學(xué)研究有限公司;哈佛大學(xué)校長(zhǎng)及研究員協(xié)會(huì)
• 主分類號(hào): A61B17/00
• 分類號(hào): A61B17/00;A61K37/24
• 代理公司: 中國(guó)專利代理有限公司
• 代理人: 林玉貞

本申請(qǐng)是Antoniades等人于1986年11月14日在美國(guó)提交的序號(hào)為930，762、題目為“治療外部傷口”申請(qǐng)案的部分后繼申請(qǐng)，該申請(qǐng)案通過(guò)引用被結(jié)合到本申請(qǐng)中。

本發(fā)明涉及傷口治療

生長(zhǎng)因子是刺激一種確定的靶細(xì)胞群體的多肽激素。生長(zhǎng)因子的例子有血小板衍生的生長(zhǎng)因子（PDGF），類胰島素生長(zhǎng)因子（IGF-I），轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子培帶（TGF-β），表皮生長(zhǎng)因子（EGF）和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）。PDGF是一種在循環(huán)血小板顆粒中發(fā)現(xiàn)的陽(yáng)離子的、熱穩(wěn)定蛋白質(zhì)，已知它有刺激體外蛋白質(zhì)合成和通過(guò)成纖維細(xì)胞刺激膠原蛋白生成的作用。它還對(duì)成纖維細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞起體外促細(xì)胞分裂劑和趨化性劑的作用。

已有人提出過(guò)利用PDGF來(lái)促進(jìn)活體傷口愈合，例如，Grotendorst????1984年在“Trauma”雜志24期549-552頁(yè)描述了把PDGF加在一種用膠原蛋白的凝膠浸漬過(guò)、并植入鼠背的亨特-希林（Hunt-Schilling）金屬絲篩盒中，發(fā)現(xiàn)PDGF提高了新膠原蛋白的合成量。然而，Leitzel等人1985年在Dermatol.Surg.Oncol.雜志11期617-622頁(yè)上認(rèn)為單獨(dú)使用PDGF或與FGF和EGF結(jié)合使用都不能加速倉(cāng)鼠正常傷口的愈合。

Michaeli等人1984年在紐約Praeger出版社出版的“Soft????and????Hard????Tissue????Repair”（軟組織和硬組織的修復(fù)）一書(shū)（Hunt，T.K.等人編輯）的380-394頁(yè)中報(bào)導(dǎo)了應(yīng)用一種從富血小板血漿中提取的PDGF的部分提純制品，植入家兔角膜時(shí)，刺激血管的生成。因?yàn)镻DGF不是一種生成血管的生長(zhǎng)因子，所以研究者認(rèn)為在他們的部分提純的PDGF制品中，有一種未知的因子導(dǎo)致了生成血管的效果。

一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的特點(diǎn)一個(gè)方面是，通過(guò)將有效量的包括有提純PDGF和提純IGF-I的一種組合物施加于傷口上，治愈哺乳動(dòng)物，例如一個(gè)病人的外部傷口。該組合物通過(guò)促進(jìn)上皮和結(jié)締組織的生長(zhǎng)及促進(jìn)全部蛋白質(zhì)和膠原的合成，幫助愈合或者至少部分愈合傷口。采用本發(fā)明的組合物治療傷口比未經(jīng)處理（即沒(méi)有施加外源劑）或只是提純的PDGF，或只用提純的IGF-I處理能達(dá)到更好的效果。

本發(fā)明的特點(diǎn)另一方面是，通過(guò)對(duì)病人施加藥物，最好向受傷的區(qū)域或缺失骨頭的區(qū)域施加有效量的包括了提純PDGF和提純IGF-I的一種組合物，使哺乳動(dòng)物、例如一個(gè)病人的骨頭再生。組合物通過(guò)促進(jìn)結(jié)締組織、骨頭和牙骨質(zhì)的生長(zhǎng)及刺激蛋白質(zhì)和膠原的合成，幫助骨頭再生或至少部分再生。采用本發(fā)明的組合物促進(jìn)再生要比未經(jīng)處理（即不用外源劑）或僅是提純的PDGF或僅用提純的IGF-I處理達(dá)到更好的效果。

在發(fā)明這兩方面的優(yōu)選的實(shí)施方案中，組合物是通過(guò)在一種藥物學(xué)上可接受的載體物質(zhì)，例如商業(yè)上可買到的惰性凝膠或液體中（例如，加有清蛋白或甲基纖維素的鹽水）將提純的PDGF和IGF-I（兩者都是商業(yè)上可買到的）相結(jié)合來(lái)制取的。提純的PDGF和ICF-1的組合，最好按重量比在1∶4到25∶1之間。優(yōu)選的范圍為1∶2到10∶1，更好的范圍是1∶1或2∶1。提純的PDGF和IGF-I可從人的血小板中獲得。或借助重組體DNA技術(shù)獲得。這樣，對(duì)于術(shù)語(yǔ)“PDGF”和“IGF-I”，我們指的是哺乳類的、特別是靈長(zhǎng)類的血小板得到的和重組體材料兩者;靈長(zhǎng)類中，人是最好的，但也可以是黑猩猩和其它靈長(zhǎng)類。重組體PDGF可以是異種二聚體重組體，其形成可以是通過(guò)將編碼了原核生物或真核生物細(xì)胞兩者亞基的DNA序列插入到原核生物細(xì)胞或真核生物細(xì)胞中，然后讓該轉(zhuǎn)譯的亞基被細(xì)胞加工形成異種二聚體，或也可僅將編碼了一個(gè)亞基（最好是培帶（beta）或“2”鏈）的DNA插入細(xì)胞，然后將其培養(yǎng)產(chǎn)生同種二聚體的PDGF（PDGF-1或PDGF-2同種二聚體）。

此處所用的術(shù)語(yǔ)“提純的”指PDGF或IGF-I在彼此混合前，其重量占95%或更多，即大體是沒(méi)有其它蛋白質(zhì)、脂類和碳?xì)浠衔锏模@些物質(zhì)是天然與其相結(jié)合的。

一種提純的蛋白質(zhì)制品對(duì)PDGF或IGF-I的每種亞基一般在聚丙烯酰胺凝膠上產(chǎn)生一個(gè)單一的主帶。本發(fā)明的組合物中采用的提純的PDGF和IGF-I最好用氨基末端的氨基酸序列分析判斷是純的。