[其他]細胞分離器及其制作方法

無效

• 申請號: 87102643
• 申請日: 1987-03-22
• 公開（公告）號: CN87102643A
• 公開（公告）日: 1987-12-30
• 發明（設計）人: 鶴純明;森省一;小松紀子;藤井茂夫
• 申請（專利權）人: 東亞燃料工業株式會社;旭光學工業株式會社
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12N5/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊松堅

本發明涉及一種能由其它類型細胞中分離特定細胞的細胞分離器及其制作方法。

為了臨床試驗、免疫診斷及免疫治療，常常要從含有各種類型之細胞混合物中分離某種特定類型的細胞。

然而，要從淋巴細胞中分離T細胞、B細胞、k細胞或Nk細胞時，至今尚未找到不改變細胞群體而分離出所要之細胞的方法。

日本專利公開204454（82）和140886（81）號公開了一種使用有機高分子化合物來分離和回收T細胞的方法，更具體地說，其中T細胞是使用一種顆粒狀的、有酸性功能團如磺酸基、羧酸基、膦酸基及酚基團的乙烯、丙烯、氯乙烯、醋酸乙烯、苯乙烯、二乙烯苯、丙烯腈、甲基異丁烯酸的聚合物或共聚物分離的。然而，使用這種方法時，剩余的單體可對細胞產生細胞毒性作用。此外，由于顆粒的平均直徑小，柱子便易于堵塞。

將交聯的葡聚糖，即Sephadex????10（為Pharmacia公司之產品的商品名）用作細胞分離器的方法是已知的。在該方法中，大的和粘附的細胞如巨噬細胞和輔助細胞可被粘附到交聯葡聚糖上而得以被分離，T細胞和B細胞則通過葡聚糖柱被洗脫。然而，這種方法中卻是使T細胞粘附，而非粘附的輔助細胞則通過交聯葡聚糖。因此，便不能得到完整的T細胞群體。

使用尼龍棉作細胞分離器的方法也是公知的富集T細胞的細胞分離方法。然而，用這種方法雖然可以得到比較高純度的T細胞，但卻改變了T細胞的細胞群體。此外，其分離能力和分離范型（圖形）將隨著尼龍棉的特定種類、散開尼龍棉的方式、裝填尼龍棉的方法以及洗脫尼龍棉的方法的不同而改變。

因此，有必要提供一種能高選擇性地、但不改變細胞群體的分離細胞的細胞分離器。

本發明的目的在于提供一種具有高選擇性和重現性的、又不改變細胞群體的分離特定細胞的細胞分離器。

本發明的另一個目的是提供一種制作細胞分離器的方法。

本發明的再一個目的是提供一種分離細胞的裝置，用這種裝置可使細胞更易于分離，並且有高選擇性和重現性。

本發明提供了一種包括含羥基磷灰石之纖維的纖維狀細胞分離器。

可按本發明的方法制作纖維狀細胞分離器，其包括：將含羥基磷灰石和粘合劑的水成懸液紡成纖維，並在一移動的表面上收集纖維以制得纖維狀羥基磷灰石。

本發明還提供了一種分離細胞的裝置，其包括一個柱子以及其中所裝有的本發明之纖維狀細胞分離器。

本發明的細胞分離器對于回收T細胞和去除免疫抑制細胞，例如抑制性T細胞是特別有效的。使用本發明之細胞分離器可高選擇性地回收T細胞而不改變細胞群體。此外，由于本發明的細胞分離器可有效地粘附抑制性免疫細胞如抑制性T細胞，故該細胞分離器亦可用于免疫治療。

圖1圖解說明了制備本發明之細胞分離器的方法。

圖2顯示用于本發明之細胞分離器的具體裝置剖面示意圖。

如上所述，本發明的細胞分離器包括含羥基磷灰石之纖維的纖維狀材料。在纖維中羥基磷灰石的含量較好是占25%（重量），最好是占50%（重量）。由分離的選擇性來看，構成纖維狀材料的纖維最好主要由羥基磷灰石構成。然而應指出的是，如果纖維主要由羥基磷灰石組成，則其強度就會降低。為此，可在纖維內加入某種加固材料，如磷酸鈣基化合物和水玻璃，以增加纖維的強度。所用加固材料中，優選的是磷酸鈣基化合物，纖維中所用加固材料的量一般不超過25%（重量）。細胞分離器亦可含有水份。細胞分離器內之含水量一般為少于50%。優選的羥基磷灰石是C_a5（PO₄）₃（OH）。其中C_a/P之摩爾比為1.4至1.8。

構成本發明之細胞分離器的纖維之直徑不受限制，但一般為1～100微米。本發明之纖維狀細胞分離器的重量也不限，但一般是5克/米²～500克/米²。

本發明的纖維狀細胞分離器可用一種特殊粘合劑經溶液紡絲之方法制成。所用粘合劑最好是水溶性的。為滿足要求最好選用有機大分子材料。用作粘合劑最好選用含-OH、-COOH和-CONH₂等功能團的水溶性線形大分子化合物。