[其他]植物種的轉化和外源基因的表達

無效

• 申請號: 87104202
• 申請日: 1987-06-10
• 公開（公告）號: CN87104202A
• 公開（公告）日: 1988-03-09
• 發明（設計）人: 喬安·菲拉蒂;布魯斯·R·托馬斯
• 申請（專利權）人: 加利福尼亞基因公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C12N15/00;A01H1/06
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 林玉貞

1、一種高效轉化植物細胞的方法，將DNA引入上述的植物細胞，該DNA能在上述細胞中復制和轉錄，該方法包括：

在植物細胞所限定的培養基中培育子葉細胞，并與含有一種構建體、并被改裝和轉化的農業土壤桿菌(Agrobacterium)細胞共培養。這種構建體包括一個T-DNA的邊界和能夠在植物細胞內轉錄的一個有價值的基因，此構建體還能夠被轉移至植物細胞內，以后整合進入該植物細胞的基因組。利用上述構建體能夠被整合進入該植物細胞基因組，以便提供被轉化的植物細胞。

除去上述轉化植物細胞的細菌，在再生培養基中培育該轉化的植物細胞，以產生帶葉的分枝，以及

轉移帶葉分枝到生根培養基中以產生小植物。

2、根據權利要求1的方法，其中上述子葉細胞是通過完全無菌的條件下，得到萌發的無菌種子，形成伸出的子葉;以及

將上述子葉至少切成兩片，除去該種子的其他部分并挑選更靠近種子的那片子葉切片。

3、根據權利要求1的一種方法，其中所說的限定培養基是指含有激素和維生素的軟的瓊脂培養基中，有每毫升10⁴-10¹⁰細胞生長，這種培養基在培育上述子葉細胞時，至少前一天制備出來。

4、根據權利要求1的一種方法，其中所說的植物細胞首先與細菌肉湯液體培養基中的上述土壤桿菌接觸，隨后將與土壤桿菌接觸過的細胞轉移到條件培養基中。

5、一種有效地轉化蕃茄植物細胞的方法，將DNA引進該蕃茄植物細胞，其中DNA能在該細胞中復制和轉錄，上述方法包括：

將子葉細胞置于植物細胞所限定的培養基中培育，與含有一種構建體、并經過改裝和轉化的土壤桿菌細胞共培養，這種構建體包括一個T-DNA邊界和在蕃茄植物細胞內能夠轉錄的有價值的基因，這種構建體能夠被轉移到蕃茄植物細胞內并且能夠整合進入該細胞的基因組，根據上述構建體整合進入該蕃茄植物細胞的基因組，以便提供轉化的蕃茄植株細胞;

除去上述轉化植物細胞的細菌，與再生培養基中該轉化的植物細胞在再生培養基中培育，以產生帶葉分枝，以及

將上述的帶葉分枝轉移到生根培養基中，以產生小植物。

6、根據權利要求5的一種方法，其中所說的子葉細胞是通過實質上在無菌條件下，使無菌種子萌發來獲得，形成伸出的子葉;以及

將上述子葉至少切成兩片，除去該種子的剩余部分并挑選靠近種子一片子葉切片。

7、一種蕃茄細胞具有編碼外源的草甘膦抗性的3-烯醇丙酮基二氧膦基莽草酸鹽合成酶的構建物。

8、一種具有外源的草甘膦抗性的3-烯醇丙酮基二氧膦基莽草酸鹽合成酶的蕃茄細胞。

9、根據權利要求7的一種蕃茄細胞，其中所說的蕃茄細胞是蕃茄（Lycopersicon??esculentum）。

10、根據權利要求8，由蕃茄細胞組成的蕃茄苗。