[其他]免疫球蛋白結(jié)合物

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 87104430
• 申請(qǐng)日: 1987-05-26
• 公開（公告）號(hào): CN87104430A
• 公開（公告）日: 1988-05-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 貝內(nèi)特·科爾曼·拉古扎;辛西婭·林恩·尼科爾斯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 伊萊利利公司
• 主分類號(hào): C07K15/14
• 分類號(hào): C07K15/14;C07D519/04;A61K39/395
• 代理公司: 中國(guó)專利代理有限公司
• 代理人: 楊九昌

免疫球蛋白是糖蛋白，即，它們是帶有連在不同部位上的寡糖的蛋白質(zhì)。這些寡糖上的鄰二醇可以被高碘酸鹽氧化產(chǎn)生二醛。產(chǎn)生的醛基可以和各種胺和肼反應(yīng)，形成希夫堿和腙。例如，Willan等人在《歐洲生化學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)》（FEBS letters）80 133（1977）中氧化一個(gè)在兔的IgG的C_H2區(qū)中與第297位天門冬酰胺殘基相連的寡糖。（此位置采用人體IgGl骨髓瘤蛋白Eu的編號(hào)系統(tǒng)）這個(gè)氧化了的物質(zhì)，在純化后，與4-氨基-2，2，6，6-四甲基-哌啶-1-烴氧基自由基反應(yīng)，產(chǎn)生的亞胺（氨基和糖上的醛基反應(yīng)）用NaBH₃CN還原產(chǎn)生一個(gè)自旋標(biāo)記的蛋白質(zhì)。Timofeev等人在《歐洲生化學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)》89 191（1978）中也用氧化了的糖蛋白單克隆抗體來制備自旋標(biāo)記的物質(zhì)。Murayama等人在《免疫學(xué)化學(xué)》（Immunochemistry）15 523（1978）將高碘酸鹽氧化了的一個(gè)免疫球蛋白（IgG）中的寡糖與含氨基的化合物通過形成希夫堿進(jìn)行標(biāo)記。天門冬氨酸和辣根過氧化物酶是所用的“胺”。天門冬氨酸-希夫堿通過逆流免疫電泳可用于檢測(cè)人體IgG的抗原性。O′Shannessy等人在《免疫學(xué)快報(bào)》（Immunology letters）8 273（1984）中將生物素酰肼化物和氧化了的免疫球蛋白的醛基偶連，并建議采用將熒光染料偶連到單克隆抗體的技術(shù)。

Chua等人在《生物化學(xué)和生物物理學(xué)報(bào)》（Biochimica????and????Biophysica????Acta）800????291（1984）中氧化了IgM的重鏈的穩(wěn)定區(qū)的糖基（此區(qū)有較高的糖含量）產(chǎn)生醛。這些醛基和連在脂質(zhì)體膜上的酰肼基團(tuán)反應(yīng)。該單克隆IgM抗體對(duì)于帶有1-二甲氨基萘-5-磺酰基半抗原的蛋白質(zhì)具有特異性。

Rothfus等人在《生物化學(xué)雜志》（J.B.C.）238????1402（1963）中用高碘酸鹽氧化然后用硼氫化物還原的方法來測(cè)定人體γ-球蛋白糖肽的糖成分的一致性。

Blair等人在《免疫學(xué)方法雜志》（J.Immun.Meth.）59????129（1983），和Ghose，Blair，Kulkarni在《酶學(xué)方法》（Methods????in????Enzymology）93????280（1983）中綜述了將細(xì)胞毒試劑連接到免疫球蛋白上的方法。Blair等人在130頁，揭示了將細(xì)胞毒試劑連接到一個(gè)Ig上的寡糖上的可能性。但未提及氧化成醛并將細(xì)胞毒試劑與醛偶連。Ghose等人提到了將兔子的連有寡糖的抗牛血清白蛋白IgG用高碘酸鹽氧化成醛基并將這些基團(tuán)和乙二胺反應(yīng)，然后硼氫物還原該希夫堿形成新的連在糖蛋白上寡糖部分上的氨乙基一級(jí)胺。

《歐洲專利申請(qǐng)公報(bào)》（EPO Application Publication）88695廣泛地?cái)⑹隽艘恍┲T如上述文章所描述的方法，即從糖部分氧化衍生出來的醛基與一種化合物的肼、酰肼或氨基這些連接基團(tuán)反應(yīng)來形成結(jié)合物。這份申請(qǐng)很顯然是針對(duì)連接基的，這些連接基可以和醛-抗體結(jié)合，并且連接基本身連到一種不溶性的支持劑或次級(jí)化合物上。也對(duì)抗體結(jié)合物申請(qǐng)專利權(quán)，這些抗體結(jié)合物包括任一通過共價(jià)的腙、亞胺或烯胺鍵結(jié)合在抗體糖基上的化合物。更專門的權(quán)利要求是針對(duì)肽連接基團(tuán)，一種氨基酸連接基團(tuán)或具有通式為W（CH₂）nQ的連接基團(tuán)，其中W為C₆H₅NHCH₂-或-CH₂-，Q為氨基酸、肽、螯合劑或螯合劑衍生物。明確地公開用這種系統(tǒng)以進(jìn)行抗體中介輸送的藥物包括柔紅霉素、博來霉素、長(zhǎng)春堿（VLB）、長(zhǎng)春新堿及5-氟尿嘧啶。但未指明這些藥物是如何連接的。特別是沒有指明長(zhǎng)春堿或長(zhǎng)春新堿是如何連接的，因?yàn)檫@兩個(gè)化合物中任何一個(gè)都不含有酰肼或氨基官能團(tuán)。它強(qiáng)調(diào)了與Fab抗體片段的偶連。但具體公開的只限于ALKERAN（N-〔雙（β-氯乙基）苯基〕丙氨酸）和抗羊紅細(xì)胞的單克隆抗體的結(jié)合。沒有提供在體內(nèi)的數(shù)據(jù)。

進(jìn)一步地，長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿和其它抗腫瘤藥也已經(jīng)連到免疫球蛋白或其它蛋白質(zhì)上。