[其他]抗銅綠假單胞菌鞭毛的單克隆抗體

無效

• 申請號: 87104581
• 申請日: 1987-08-25
• 公開（公告）號: CN87104581A
• 公開（公告）日: 1988-09-21
• 發明（設計）人: 馬克·E·羅斯特羅姆;安托尼;W·西亞達克;麥·約恩·羅索克
• 申請（專利權）人: 遺傳學系統公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;A61K39/395;G01N33/577
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 顧柏棣,李瑛

本申請是1986年12月24日提交的美國專利序列號946554的部分繼續申請，而946554號是在1986年7月3日提交的美國專利序列號881984的部分繼續申請，這兩份申請都通過在此引述而合并于本申請中。

本發明涉及用免疫技術提供用于診斷和治療細菌感染的新物質，具體而言，是生產和應用能識別銅綠假單胞菌（Pseudomonas????aeruginosa）鞭毛的單克隆抗體。

革蘭氏陰性疾病及其大多數的嚴重并發癥，如敗血癥和內毒素血癥，是人類患者嚴重發病和死亡的原因。革蘭氏陰性菌銅綠假單胞菌更是如此，在過去的五十年中，它與細菌感染，特別是醫院感染的伴隨日漸增長。

在過去的幾十年中，抗菌素被選來控制革蘭氏陰性疾病。但是，革蘭氏陰性細菌疾病的高發病率以及高死亡率表明抗菌素的治療作用是有限制的，對銅綠假單胞菌更是如此。[參見：Andriole，V，G.“Pseudomonas????Bacteremia：Can????Antibiotic????Therapy????Improve????Survival？”，J.Lab.Clin.Med.（1978）94：196-199]這就促進了尋找另外的預防和治療方法。

已被研究的一種方法是用主動或被動免疫使宿主的免疫系統得到增強的方法。例如，已經觀察到的是，利用銅綠假單胞菌的全細菌疫苗或其純化的細菌性內毒素對人或實驗動物進行主動免疫，則導致產生一種特異性的調理抗體，該抗體主要抵抗銅綠假單胞菌外層細胞膜上脂多糖（LPS）的重復寡糖的決定族[見Pollack，M.，Immunoglobulins：Characteristics????and????Uses????of????Intravenous????Preparations，Alving，B.M.，and????Finlayson，J.S.des.，pp.73-79，U.S.Department????of????Healthy????and????Human????Servises，1979]。這些抗體，不論是主動產生的或是被動輸入的，均在各種實驗動物中顯示出抵抗由銅綠假單胞菌引起的致死效應（Pollack，同上），而且在某些對人的初步試驗中也是如此（見Young，L.S.and????Pollack，M.，Pseudomonas????aeruginosa，Sabath，L.，ed.，pp????119-112，Hans????Huber，1980）。

上述報道提出，免疫治療方法可以用來預防和治療由銅綠假單胞菌引起的細菌性疾病，如施用被收集來的那些含抗侵染菌的抗體的人免疫球蛋白。此處所說的免疫球蛋白指的是人血漿中富含抗體的部分或組分，其中的代表是抗銅綠假單胞菌的特異性抗體。然而，由于在使用人免疫球蛋白成分時所遇到的種種限制，因而使用這種方法治療由銅綠假單胞菌引起的疾病仍處于研究探索階段[見Collins，M.S.and????Roby，R.E.Am.J.Med.，76（3a）：168-174，（1984）]，而且目前也沒有這些成分的市售商品可用。

與免疫球蛋白組分相關的一種限制是，它們收集自成千上萬的供血者的樣品中，這些樣品預先對是否存在抗銅綠假單胞菌抗體進行了篩選。這種收集方式導致各個抗體效價被平均化，這樣就至多使所需抗體的最終效價得到有限的提高。

另一個限制是，這種通過預先篩選的方式使要保證產物的一致性就必須廣泛地，連續地篩選供者。盡管做了上述各種努力，但免疫球蛋白在每一批之間，以及在各不同地理區域內得到的產物之間均仍有相當大的差異。

免疫球蛋白組合物所固有的另一限制是在使用的同時也帶有大量外源蛋白性物質（它可能包括病毒，如那些近來被發現與獲得性免疫缺乏綜合癥相關的病毒），可能會引起生物學副作用。所需抗體的低效價與大量外源物質相結合，經常使特異性被限制在最適水平以下，因而也限制了給患者施用免疫球蛋白的效益。

1975年，Kohler和Milstein報道了他們的初期發現，即某些鼠細胞株可與鼠脾細胞融合而產生雜交瘤，雜交瘤能產生單一特異性的抗體，也就是單克隆抗體[Kohler，G.，and????Milstein，C.，Nature，256：495-497（1975）]。自從這項技術出現以來，在某些情況下，就使得大量生產對特殊決定簇或抗原上的決定簇具有專門特異性的鼠抗體成為可能。隨后應用以后發展起來的技術，使生產人單克隆抗體也成為可能（見美國專利第4464465號，該文通過在此引述而合并于本文）。