[其他]純化的熱穩定性酶以及用其進行擴增、檢測和/或克隆核酸順序的方法

無效

• 申請號: 87105787
• 申請日: 1987-08-21
• 公開（公告）號: CN87105787A
• 公開（公告）日: 1988-05-11
• 發明（設計）人: 亨利·安東尼·歐力契;格倫·霍恩;蘭德爾·基切·塞基;卡里·倍克·默立斯;戴維·赫勞·吉爾范特;法蘭塞斯·考克·勞爾;蘇賽恩·斯托番爾
• 申請（專利權）人: 塞特斯公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N9/00;C12Q1/68
• 代理公司: 上海專利事務所
• 代理人: 張綺霞

1、一種用于催化核苷酸三磷酸酯結合而形成與核酸模板鏈互補的核酸鏈的純化(的)熱穩定性酶。

2、根據權利要求1所述的酶，其特征在于所說的酶是DNA聚合酶。

3、根據權利要求1或2所述的酶，其特征在于所說的酶的分子量約為86，000～96，000道爾頓。

4、根據權利要求3所述的酶，其特征在于所說的酶系從棲熱菌屬aquaticus中得到。

5、根據權利要求1、2、3、或4所述的方法，其特征在于所說的酶在pH6.4時的活性至少為pH8.0時活性的50%。

6、根據權利要求1、2、3、4或5所述的方法，其特征在于所說酶是天然酶。

7、一種為根據權利要求2所述的酶編碼的基因。

8、根據權利要求7所述的基因，其特征在于所說基因是從棲熱菌屬aquaticus基因組中克隆。

9、根據權利要求8所述的基因，其特征在于所說基因對分子量約為86，000-90，000道爾頓的酶編碼。

10、根據權利要求8所述的基因，其特征在于所說基因對分子量約為60，000-65，000道爾頓的酶編碼。

11、根據權利要求9所述的基因，其特征在于它包含在棲熱菌屬aquaticus或噬菌體CH35：Taq^＃4-2的約3∶5千堿基BglⅡ-Asp 718（部分）限制斷片中。

12、根據權利要求10所述的基因，其特征在于所說基因包含在棲熱菌屬aquaticus基因組或質粒pFC85中的約2.8千堿基HindⅢ-Asp??718限制斷片內。

13、一種選自pFC85或pFC83的質粒。

14、一種噬菌體CH35：Taq^＃4-2。

15、一種穩定性酶制劑，它包括根據權利要求1至6條中任一條所述的酶，而這種酶存在于包含一種或一種以上非離子型高分子去污劑的緩沖劑中。

16、根據權利要求15所述的制劑，其特征在于所說去污劑的濃度分別約為總制劑的0.1%至0.5%（以體積計）。

17、根據權利要求15或16所述的制劑，其特征在于所說去污劑是聚氧乙烯化脫水山梨糖醇甘油-月桂酸和乙氧基化壬基酚。

18、根據權利要求15、16或17所述的制劑，其特征在于所說緩沖劑包括丙三醇、三羥甲基氨基甲烷-Cl（pH8.0）、EDTA、二硫蘇糖醇、聚氧乙烯化脫水山梨糖醇甘油-月桂酸、乙氧基化壬基酚和白明膠。