[其他]種子特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 87106120
• 申請日: 1987-07-31
• 公開（公告）號: CN87106120A
• 公開（公告）日: 1988-06-22
• 發(fā)明（設計）人: 讓·C·克里;維·C·克瑙夫
• 申請（專利權）人: 加利福尼亞基因公司
• 主分類號: A01H1/06
• 分類號: A01H1/06
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 林玉貞

為種子特異性轉(zhuǎn)錄提供植物材料的遺傳修飾。可以調(diào)節(jié)內(nèi)源性產(chǎn)品的生產(chǎn)或提供新的生產(chǎn)能力。

在遺傳修變中的主要重點已經(jīng)對準原核????生物細胞或哺乳動物細胞。業(yè)已證明，由于種種原因，植物細胞比原核生物細胞更難于進行遺傳操作。其部分原因是由于其包括了不同的目的，迄今大部分植物修變已經(jīng)針對改變整個植物或活體植物的特定部分，而不同于改變培養(yǎng)的細胞。

從多方面的應用出發(fā)，人們期望能提供在植物的特殊部分或植物生長周期的特定時間進行轉(zhuǎn)錄。為此目的，目前已將注意力集中在修變某些內(nèi)源性植物產(chǎn)物，而這些產(chǎn)物的轉(zhuǎn)錄或表達是以一種有利的方式被調(diào)節(jié)的。在鑒定這類產(chǎn)品時，首先必須尋找那些出現(xiàn)于細胞生長周期的特定時間或出現(xiàn)于特定植物部分的產(chǎn)物，證明其不存在于其它時間或其它部分，確定與該產(chǎn)物相聯(lián)系的核苷酸序列，之后鑒定植物基因組中的序列，以得到與轉(zhuǎn)錄相關的5′非翻譯的序列。為此必須首先鑒定特定序列，之后確證其為正確序列并分離預期的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)域。之后則須制備適當?shù)臉嫿ㄎ铮M而證明該構建物是可以以預期的方式發(fā)揮效能的。

鑒定這樣的序列是一個富于挑戰(zhàn)性的課題，其主要困難是在于測定易于出現(xiàn)錯誤而且不易確定。然而，現(xiàn)已更多地注意到能夠遺傳修變植物，為此付出大量的研究經(jīng)費并在鑒定轉(zhuǎn)錄序列和對其進行遺傳操作以確定其實用性方面作了大量工作。

相關文獻：

Crouch等人（Molecular????Form????and????Funetion????of????the????Plant????Genome，eds、van????Vloten-Doting，Groot????and????Hall，Plenum????Publishing????Corp.1985，pp555～566）、Crouch和Sussex（Planta（1981）153：64～74）、Crouch等人（J.Mol.Appl.Genet.（1983）2：273～283）以及Simon等人（Plant????Molecular????Biology（1985）5：191～201）描述了甘藍型油菜（Brassica????napus）儲存蛋白的各個方面。Beachy等人（EMBO????J.（1985）4：3047～3053）、Sengupta-Gopalan等人（Proc，Natl.Acad.Sci.USA（1985）82：3320～3324）、Greenwood和Chrispeels（Plant????Physiol（1985）79：65～71和Chen等人（Proc.Natl.Acad.Sci.USA（1986）83：8560～8564）描述了有關種子儲存蛋白和遺傳操作的研究。Eckes等人（Mol.Gen.Genet.（1986）205：14～22）和Fluhr等人（Science（1986）232：1106～1112）描述了對光誘導的植物基因的遺傳操作。

本發(fā)明提供的DNA構建物可用于操縱植物細胞，以使之為產(chǎn)生種子特異性轉(zhuǎn)錄提供保證。特別是，將儲存蛋白轉(zhuǎn)錄區(qū)域連接于野生型基因以外的片段上并引入植物基因組內(nèi)，進而提供種子特異性轉(zhuǎn)錄。該構建物提供了對內(nèi)源性產(chǎn)物的調(diào)節(jié)以及異源性產(chǎn)物的產(chǎn)生。

提供新的DNA構建物，可用于對種子轉(zhuǎn)錄的修變，特別是種子成熟期間胚胎內(nèi)的轉(zhuǎn)錄的修變。該DNA構建物包含一與種子生成有關的，特別是與胚胎形成及種子成熟有關的調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄起始區(qū)。其中特別有用的是與儲存蛋白，如napin，cruciferin，β-conglycinin和云扁豆蛋白等有關的轉(zhuǎn)錄起始區(qū)。可由任何方便易得的宿主，特別是蕓苔屬（Brassica），例如甘藍型油菜（napus）或油菜（Campestris），大豆（Glycine????max），菜豆（Phaseolus????Vulgaris），玉米（Zea????mays），棉花（Gossypium????SP.），紅花（Carthamus????tinctorius），蕃茄（Lycopersican????esculentum）和萼距花屬（Cuphea）等植物宿主得到轉(zhuǎn)錄起始區(qū)。