[其他]新的多肽及其生產

無效

• 申請號: 87108308
• 申請日: 1987-12-24
• 公開（公告）號: CN87108308A
• 公開（公告）日: 1988-08-17
• 發明（設計）人: 阪口雅郎;本多;西村紀
• 申請（專利權）人: 武田藥品工業株式會社
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;//;C12R119)
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊九昌

本發明涉及有很好的藥理等作用的新的多肽及其生產。

γ-干擾素（以下也稱為IFN-γ）由免疫活性細胞在一定條件下產生，而在同樣條件下亦可促進淋巴細胞的胚細胞樣轉變和產生淋巴因子。因此IFN-γ又稱為免疫干擾素。據報導IFN-γ比IFN-α和IFN-β具有更高的抑制細胞增殖活性和抗腫瘤活性，因此預料IFN-γ在臨床上將得到很好的應用。然而，直至今天，由于IFN-γ生產方法中還存在某些問題，如需要供應新鮮的淋巴細胞，所以還沒有有效的生產方法。

最近由于基因重組技術廣泛應用，使IFN-γ互補DNA（cDNA）中的核苷酸順序和氨基酸順序（從前者推斷）通過克隆cDNA而被闡明。同樣也有可能利用各種宿主使cDNA和化學合成基因進行自身表達（Gray，P.W.et????al.，Nature，295，503（1982）;Debos，R.et????al.，Nucleic????Acids????Research，10，2487（1982）;Tanaka，S.et????al.，Nucleic????Acids????Research，11，1707（1983）〕。

Gray????et????al〔Nature，295，503（1982）〕and????Derynck????et????al.〔Nucleic????Acids????Research，10，3605（1982）〕提出一種由146個氨基酸分子組成的肽類的IFN-γ。本說明書中所指IFN-γ具有與上述參考文獻中相同數目的氨基酸（參閱圖4）。

同樣也可能利用單克隆抗體大量制備通過基因重組獲得的IFN-γ（以下也稱為rIFN-γ）〔EP專利公告第0103898號〕。

許多試驗都試圖從IFN-γ的氨基酸順序中去除部分氨基酸順序，這些順序不直接關系到IFN-γ的生物活性。

例如，日本專利公開第202899/1985號，它與EPC專利公告第146354號一致，公開了某些氨基酸順序，這些順序來自IFN-γ中N-末端肽鏈C¹_ys-T²_yr-C³_ys的缺失或一個由1至17個氨基酸分子組成的肽的氨基酸順序（該順序起始自IFN-γ的C-末端肽鏈¹³⁰_Gly-…-¹⁴⁶_Gln的C-末端）的缺失。

另外，日本專利公開第233，100/1985號，它與EP專利公告第161，504號一致，公開了IFN-γ的部分氨基酸順序：5至127、1至127和5至146。但在這三種順序中，氨基酸順序5至127不能自身表達為多肽，盡管已構建了用于肽表達的DNA。

日本專利公開第5，096/1986號，它與EP專利公告第166，993號一致，所公開的氨基酸順序來自IFN-γ中N-末端氨基酸順序Cys-Tyr，Cys-Tyr-Cys或Cys-Tyr-Cys-Gln的缺失和由1至16氨基酸分子組成的一種氨基酸順序或一種肽（起始自IFN-γ的C-末端肽鏈¹³¹_Lys-…-¹⁴⁶_Gln的C-末端）的缺失。

如上述，已對來源于IFN-γ中N-末端或C-末端氨基酸順序（或肽）缺失的多肽進行了許多研究。本發明的目的是提供一種具有最高IFN-γ活性的多肽，其C-末端氨基酸順序比上述任何一種多肽都要短。

在進行確定rIFN-γ活性部位的研究后，本發明者發現，某些IFN-γ的部分多肽比圖4所示的完整IFN-γ表現出更高的活性，這些部分多肽比那種其C-末端氨基酸為第126位上的Ala、以及那種其C-末端氨基酸為從第122位上的Glu至第125位上的Pro的多肽要短。

本發明者在這一發現的基礎上進行了進一步研究，完成了本發明。

本發明包括：

（1）式（Ⅰ）的多肽（Ⅰ）：

（N）H-X-Y-⁵_AspPro Tyr Val

Lys????Glu????Ala????Glu????Asn????Leu????Lys

Lys????Tyr????Phe????Asn????Ala????Gly????His

Ser????Asp????Val????Ala????Asp????Asn????Gly