[其他]用汽相過(guò)氧化氫來(lái)給活性細(xì)胞上面或附近的表面清除污染的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 87108360
• 申請(qǐng)日: 1987-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN87108360A
• 公開(kāi)（公告）日: 1988-12-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 威廉姆·C·施密特;詹姆斯·R·理克洛夫
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 美國(guó)消毒器公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61L2/20
• 分類(lèi)號(hào): A61L2/20;A01N25/00;A61K33/40
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專(zhuān)利代理部
• 代理人: 顧柏棣

本發(fā)明涉及清除污染的方法，特別是用汽相過(guò)氧化氫清除污染的方法。

微生物體污染是當(dāng)今人們?cè)谂嘤?xì)胞組織培養(yǎng)物時(shí)所遭遇的最困難的問(wèn)題之一。污染浪費(fèi)時(shí)間和金錢(qián)，并導(dǎo)致有價(jià)值的細(xì)胞組織培養(yǎng)物的損失。除了污染問(wèn)題之外，植物組織培養(yǎng)者還面臨在培養(yǎng)之前對(duì)植物組織進(jìn)行“滅病原”所引起的問(wèn)題。目前，還沒(méi)有不冒著損害植物組織本身的危險(xiǎn)來(lái)對(duì)植物組織滅病原的便利方法存在。

因?yàn)橐阎那宄廴痉椒?，例如蒸汽或氧化乙烯處理?huì)破壞培養(yǎng)物，所以，還沒(méi)有已知的對(duì)帶有培養(yǎng)物的細(xì)胞組織培養(yǎng)箱在固有位置上清除污染，即在原有地點(diǎn)清除污染的方法存在。由于缺少在原地清除污染的能力，所以采用了各種技術(shù)來(lái)減小細(xì)胞組織培養(yǎng)物的污染機(jī)會(huì)。曾經(jīng)設(shè)計(jì)過(guò)提供有垂直層狀空氣流通過(guò)培養(yǎng)容器的培養(yǎng)箱。這個(gè)層狀空氣流有助于阻止空氣中的污染物接觸細(xì)胞組織培養(yǎng)物。有一個(gè)制造者設(shè)計(jì)了一種帶有銅箱壁的培養(yǎng)箱，它在適當(dāng)條件下具有殺細(xì)菌和殺真菌的特性。然而，這種培養(yǎng)箱不能消除在空氣中的、擱架上的或者各種細(xì)胞組織培養(yǎng)箱上的污染物。過(guò)去，曾經(jīng)把抗菌素加到細(xì)胞組織培養(yǎng)物中以防止污染。然而，在細(xì)胞中會(huì)產(chǎn)生遺傳或新陳代謝的改變，并且目前在所有可能的情況下都希望避免把抗菌素加到菌種生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。因此，需要一種方法，它能夠在原地對(duì)帶有培養(yǎng)物的細(xì)胞組織培養(yǎng)箱清除污染。

現(xiàn)在植物細(xì)胞培養(yǎng)者在培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)之前還需使用粗糙的方法對(duì)植物細(xì)胞滅病原。目前的實(shí)驗(yàn)操作包括把樣品在稀釋的Chlorox（1%）、戊二醛、或者乙醛中浸泡高達(dá)30分鐘。許多植物細(xì)胞不容易受到這些消毒劑的影響。然而，沒(méi)有有效的替代方法存在。試試和改改是用來(lái)獲得純凈培養(yǎng)物的一般方法。因此，需要一種方法，它能使植物細(xì)胞培養(yǎng)者在培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)之前對(duì)植物細(xì)胞滅病原。

已經(jīng)知道即使是低濃度的汽相過(guò)氧化氫也能對(duì)清除污染和消毒有效。雖然在過(guò)去汽相過(guò)氧化氫已被用于此目的，但是這樣的使用還沒(méi)有包括活細(xì)胞。例如，Coulter的名為“儲(chǔ)藏面包房制品”的美國(guó)專(zhuān)利2，193，622，Moore等人的名為“過(guò)氧化氫蒸汽消毒方法”的美國(guó)專(zhuān)利4，169，123，以及Forstrom等人的名為“冷氣消毒方法”的美國(guó)專(zhuān)利4，169，124。在這些專(zhuān)利中，汽相過(guò)氧化氫都被用于消毒，但都不是在含有活細(xì)胞的環(huán)境下使用。

圍繞被固定的整個(gè)細(xì)胞已經(jīng)使用液相過(guò)氧化氫，但這是為了增強(qiáng)氧化作用的目的而不是為了清除污染。例如Holst所著的“過(guò)氧化氫作為一種用于固定的Gluconobacter????oxydans的氧氣源”，見(jiàn)“應(yīng)用微生物學(xué)和生物工藝學(xué)22”，383-388頁(yè)。這個(gè)方法的主要缺點(diǎn)是在過(guò)氧化氫轉(zhuǎn)變成為氧氣和水的酶分解之前濃度為（34mg/l）的液相過(guò)氧化氫破壞了大多數(shù)細(xì)胞。

顯然，需要一種在原地清除污染的便利的方法，以及一種在培養(yǎng)之前對(duì)植物細(xì)胞滅病原的方法。

本發(fā)明是一種在預(yù)定區(qū)域內(nèi)選擇性地破壞生物體從而能夠在原地清除污染的方法。氣相過(guò)氧化氫以足夠產(chǎn)生預(yù)定要達(dá)到的過(guò)氧化氫濃度的流量被導(dǎo)入預(yù)定區(qū)域，與此同時(shí)要防止在該預(yù)定區(qū)域內(nèi)的過(guò)氧化氫壓力或凝結(jié)的任何實(shí)質(zhì)性改變。維持這個(gè)預(yù)定的過(guò)氧化氫濃度一段時(shí)期，使它足以破壞不想要的生物體。然后，在該時(shí)期過(guò)去之后并在所需要的生物體被過(guò)氧化氫損害之前把汽相過(guò)氧化氫從該區(qū)域排出。

本發(fā)明的方法可連同諸如培養(yǎng)箱和高壓滅菌器等容箱一起使用。本發(fā)明的方法可供在該封閉區(qū)域內(nèi)對(duì)所有外表面，包括放有細(xì)胞組織培養(yǎng)物的容器的表面清除污染或者消毒，以及在該封閉區(qū)域內(nèi)破壞空氣中的微生物之用。然而，要控制暴露時(shí)間和過(guò)氧化氫濃度以使細(xì)胞組織培養(yǎng)物不受汽相過(guò)氧化氫的影響。

按照本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，它預(yù)先提出把所需要的生物體放在許多容器中，在每一個(gè)容器的開(kāi)口處都有一個(gè)曲折的通道。監(jiān)視汽相過(guò)氧化氫的預(yù)定濃度以及該預(yù)定濃度維持的時(shí)間，以使過(guò)氧化氫沒(méi)有足夠的時(shí)間通過(guò)該曲折通道而到達(dá)生物體。

按照本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例，它預(yù)先提出把所需要的生物體放在許多容器中，在每一個(gè)容器的開(kāi)口處都有一個(gè)過(guò)濾器。監(jiān)視汽相過(guò)氧化氫的預(yù)定濃度以及該預(yù)定濃度維持的時(shí)間，以使過(guò)氧化氫沒(méi)有足夠的時(shí)間通過(guò)該過(guò)濾器而到達(dá)生物體。

在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施例中，所需要的生物體被放在許多開(kāi)口容器中。監(jiān)視汽相過(guò)氧化氫的預(yù)定濃度以及該預(yù)定濃度維持的時(shí)間，以使過(guò)氧化氫對(duì)所需要的生物體滅病原而又不損害它們。