[其他]酶活力測定儀

無效

• 申請號: 87200230
• 申請日: 1987-01-19
• 公開（公告）號: CN87200230U
• 公開（公告）日: 1988-01-20
• 發明（設計）人: 劉瑞蓮;盧明春;師文潔
• 申請（專利權）人: 上海電視十一廠
• 主分類號: C12Q1/00
• 分類號: C12Q1/00
• 代理公司: 上海市儀表電訊工業局專利事務室
• 代理人: 曹建成,丁偉明

本實用新型所涉及的是一種改進的酶活力測定儀，特別是一種以動力學方法測定酶反應的電化學分析儀器。適用于測定多種酶系的活力。

國內，目前是采用常規比色法來檢測酶的活力。該方法從三、四十年代沿用至今，缺點是：（1）時間長，如檢測糖化酶活力，時間長達一小時左右；（2）成本高，由于測試中需用多種試劑，其發色劑價格比較貴，導致了成本高；（3）手續繁復，對樣品必須進行預處理；（4）精度低，由測試者憑經驗目測來決定滴定終點，增加了測試誤差。

為了解決上述問題，日本專利申請昭58－183089、昭58－183090提出了使用多只反應池，采用酶膜電極參加反應和附加電腦校正系統的酶活性測定裝置。由于酶很容易失活，采用此裝置時電極表面的酶膜需經常更換，造成操作不方便。由于裝置中使用多只反應池，測試中進行多次反應，所以需要附加電腦系統進行對比校正，使得整個儀器的制造難度大、造價比較高。另外該裝置采用計流器記錄電流變化，靈敏度比較低。

本實用新型的目的是要解決上述問題，提供一種改進的酶活力測定儀，它不僅能夠方便、迅速、精確地測出酶的活力，而且結構簡單、造價低廉、特別適合我國國情，便于推廣應用。

本實用新型是通過以下方式實現的：

（一）在化學反應部份中，用鉑絲電極代替酶膜電極。

（二）在檢測部份中采用微恒電流裝置，記錄電壓的變化，代替恒電壓記錄電流的變化。

（三）用一個反應池取代多個反應池或反應池組。

由于用鉑絲電極代替酶膜電極，從根本上避免了酶失活的問題，使測試后對電極的處理變得極為簡單方便，只要用去離子水沖洗干凈即可反復使用。既提高了測試穩定性又提高了使用壽命。由于采用鉑絲構成電極，反應池可以壓縮到僅用一只，縮短了測試時間，減少了所用試劑的品種，同時省掉了對比、校正系統，使整個設備結構簡單、造價低。由于在檢測系統中，用微恒電流裝置記錄電壓變化來代替恒電壓記錄電流變化，提高了測試靈敏度。

下面結合附圖詳細介紹本實用新型的測試實例：

圖1是本實用新型實施例示意圖，其中，

1——鉑對電極????????2——甘汞電極????????3——接觸溫度計????????4——反應池????????5——攪拌棒????????6——恒溫池????????7——恒溫磁力攪拌器????????8——電流表????????9——數字顯示????????10——調零????????11——電流????????12——測量????????13——顯示????????14——電源開關????????15——記錄儀。

圖2是所舉實施例的標準曲線。

圖3是所舉實施例的記錄儀測繪圖。

1、試劑的配制：

（一）膽堿脂酶（簡稱chE）標準液：稱取chE1毫克溶于10毫升PH值為7.4????0.1M的三羥甲基氨基甲烷（簡稱Tris）鹽酸（Hcl）緩沖液的容量瓶中（即濃度為0.1毫克／毫升或0.4活力單位／毫升），冷藏。

（二）硫代乙酰膽堿碘化物（基質）簡稱Acschl溶液：精確稱取Acschl100毫克溶于10毫升PH7.4????0.1M????Tris－Hcl緩沖液中，即基質液濃度10毫克／毫升，冷藏。

（三）PH7.4????0.1M????Tris－Hcl緩沖液：稱取三羥甲基氨基甲烷12.1克溶于去離子水中，用1NHcl調節PH到7.4，然后用去離子水稀釋至1升，冷藏。

2、標準曲線的繪制：

參照圖1，在反應池中加入11.5毫升Tris－Hcl緩沖液和1毫升基質液（10毫克／毫升），插入三電極系統（鉑對電極和217型飽和甘汞電極），于電磁攪拌下控溫于31±0.5℃，接通電源，調微恒電流為25μA并連接記錄儀，使記錄筆處于中心位置，此時顯示器表示（0.45V左右），調紙速為6000mm／小時，此時記錄紙上繪出一直線，數秒鐘以后，分別加入20、40、60、80、100微升chE標準液，作切線分別記錄△E和△t值（見圖3），以△E／△t比值為縱座標，chE濃度為橫座標，繪制標準曲線（見圖2）。

3、樣品的測試：

在反應池中加入11.5毫升PH7.4????0.1MTris－Hcl緩沖液和1毫升基質液，插入三電極系統，操作步驟均同繪制標準曲線一樣，此時記錄紙上繪出一直線。數分鐘后，加入0.2毫升抗凝血樣，即刻在記錄紙上繪出一曲線（見圖3），通過作圖得出△E／△t＝1.75毫伏／秒，從圖2中查得chE濃度為0.011毫克／毫升，（0.044活力單位／毫升）。