[其他]植物的組織培養方法

無效

• 申請號: 88101342
• 申請日: 1988-02-09
• 公開（公告）號: CN88101342A
• 公開（公告）日: 1988-09-28
• 發明（設計）人: 元山吉夫;木谷重和;松原浩一
• 申請（專利權）人: 三井石油化學工業株式會社
• 主分類號: C12N5/02
• 分類號: C12N5/02
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊麗琴

本發明涉及植物的組織培養方法。更具體地說，本發明是一種在液體培養基中進行植物組織培養的方法，它是在培養過程中，按規定的條件間歇地向培養基供給植物激素，以使培養能在具有高的細胞生長率的情況下，長期穩定地進行。

在以往的組織培養方法中，即使在開始培養時使用了具有規定濃度的植物激素的培養基，但卻沒有嘗試過在此以后，向培養基中額外追加植物激素等營養成份，來適當調整其濃度，以便連續進行培養。

在培養開始之后，培養基成份如植物激素被細胞所消耗，其濃度會逐漸降低，某些培養基成份的濃度會降到不利于繼續培養的程度。采用以往的這種一次性投料培養方法，細胞的生長速度低，而且細胞生長的穩定性也差。

另一方面，還有一種已知的、將培養液與培養產物一起排出培養區域之外，然后更新培養基的連續培養方法，例如，在“發酵工藝學”第六十一卷，第117-128頁（1983年）中，描述了一種煙草植物細胞的連續培養方法，這是一種不斷更新含有植物激素2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）的液體培養基的連續培養方法。在這種情況下，培養期內，培養基中植物激素的濃度可認為幾乎是恒定的。就更新培養基的培養方法來說，日本特公昭61-36915號公報中描述了一種懸浮細胞的高濃度培養方法，該方法是將培養液中細胞沉淀后所得到的上部澄清的培養液排出培養皿外，同時再加入新鮮培養基。然而，這些已有的培養方法，所培養的細胞的生長速度低，并且細胞的生長穩定性不令人滿意，因此，由培養而獲得的包括生物堿和色素在內的二次代謝產物的產量不足，大有改進的余地。

鑒于以上的背景技術，本發明人等探討了與以往的培養方法相比，細胞的生長速度快、生長穩定性高、而且能高效率、高產量的生產二次代謝產物的培養方法;還發現，在培養期內，沒有必要一定使植物激素維持恒定的濃速，而應該根據細胞的生長情況適當改變植物激素的濃度。基于這些見解，我們作出了能達到上述目的的關于組織培養方法的發明。

就是說，根據本發明，提供一種采用液體培養基進行植物組織培養的方法，該方法是在培養過程中，在滿足下列條件（a）和（b）的前提下，間歇地向培養基中供給植物激素：

（a）植物激素的供給間隔時間D定為細胞增加一倍所需時間的0.5～5倍。

（b）向培養基內供給的植物激素的量要滿足式〔Ⅰ〕：

10^-12＜ (A)/(D·W) ＜10^-6〔Ⅰ〕

式中：A表示向培養基內間歇供給的植物激素的量（摩爾），W表示培養區域內細胞的鮮重（克），D表示供給植物激素的間隔時間（天）。