[發明專利]人NT-proBNP特異性單克隆抗體制備方法和應用在審
| 申請號： | 202310576732.4 | 申請日： | 2023-05-22 |
| 公開（公告）號： | CN116535504A | 公開（公告）日： | 2023-08-04 |
| 發明（設計）人： | 溫志剛;林朝喜 | 申請（專利權）人： | 深圳市睿盟創新生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/26 | 分類號： | C07K16/26;C12N5/20;C12N15/13;G01N33/74;G01N33/543;G01N33/577 |
| 代理公司： | 華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人： | 王秉麗 |
| 地址： | 518051 廣東省深圳市南山區前海深港合作區*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | nt probnp 特異性 單克隆抗體 制備 方法 應用 | ||
1.一種結合蛋白，其具有抗原結合結構域，所述抗原結合結構域能夠特異性結合NT-proBNP的第66至76位氨基酸區域且不能結合proBNP，或者所述抗原結合結構域能夠特異性結合NT-proBNP的第5至27位氨基酸區域且還能特異性結合proBNP。
2.根據權利要求1所述的結合蛋白，其中，所述抗原結合結構域選自如下抗原結合結構域a和抗原結合結構域b中的一種；
其中，
抗原結合結構域a包含如下至少一個CDR：
CDR1-VH：序列如SEQ?ID?NO.10所示，或者與SEQ?ID?NO.10所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR2-VH：序列如SEQ?ID?NO.11所示，或者與SEQ?ID?NO.11所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR3-VH：序列如SEQ?ID?NO.12所示，或者與SEQ?ID?NO.12所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR1-VL：序列如SEQ?ID?NO.13所示，或者與SEQ?ID?NO.13所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR2-VL：序列如SEQ?ID?NO.14所示，或者與SEQ?ID?NO.14所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR3-VL：序列如SEQ?ID?NO.15所示，或者與SEQ?ID?NO.15所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
抗原結合結構域b包含如下至少一個CDR：
CDR1-VH：序列如SEQ?ID?NO.4所示，或者與SEQ?ID?NO.4所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR2-VH：序列如SEQ?ID?NO.5所示，或者與SEQ?ID?NO.5所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR3-VH：序列如SEQ?ID?NO.6所示，或者與SEQ?ID?NO.6所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR1-VL：序列如SEQ?ID?NO.7所示，或者與SEQ?ID?NO.7所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR2-VL：序列如SEQ?ID?NO.8所示，或者與SEQ?ID?NO.8所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
CDR3-VL：序列如SEQ?ID?NO.9所示，或者與SEQ?ID?NO.9所示序列相比具有一個或者多個氨基酸插入、替換或缺失；
可選地，氨基酸插入、替換或缺失的數量不超過3個，優選為1個；
進一步可選地，所述替換為保守性氨基酸替換。
3.根據權利要求2所述的結合蛋白，其中，所述結合蛋白具有至少3個CDR；
可選地，所述結合蛋白包括6個CDR。
4.根據權利要求1至3任一項所述的結合蛋白，其為抗體、抗體的抗原結合片段或者小模塊免疫藥物；
可選地，所述結合蛋白為單克隆抗體、F(ab’)2片段、Fab’片段、Fab片段、Fv片段、scFv片段、線性抗體、多特異性抗體、微型抗體、螯合重組抗體、內抗體、納米抗體、結合結構域免疫球蛋白融合蛋白、小模塊免疫藥物、駱駝化抗體或者含有VHH的抗體。
5.根據權利要求1至3任一項所述的結合蛋白，其還包括重鏈骨架區和/或輕鏈骨架區；
可選地，所述重鏈骨架區和/或所述輕鏈骨架區包含來源于人的抗體骨架區序列；
進一步可選地，所述重鏈骨架區和所述輕鏈骨架區的序列全部為來源于人的抗體骨架區序列。
6.根據權利要求1至3任一項所述的結合蛋白，其還包含抗體恒定區；
可選地，所述抗體恒定區的序列選自IgG、IgA、IgM、IgE及IgD任何其中之一恒定區的序列；
進一步可選地，所述抗體恒定區的種屬來源為牛、馬、豬、羊、大鼠、小鼠、豚鼠、狗、貓、兔、駱駝、驢、鹿、貂、雞、鴨、鵝或者人；
更進一步可選地，所述抗體恒定區來源于人。
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