[其他]免疫復合物的檢測方法和步驟

無效

• 申請號: 86103610
• 申請日: 1986-05-30
• 公開（公告）號: CN86103610A
• 公開（公告）日: 1987-01-21
• 發明（設計）人: 邁克爾·D·羅普
• 申請（專利權）人: 白奧斯塔醫藥產品公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 顧柏棣,辛敏忠

在抗感染物方面，免疫系統代表著機體的主要防御機制。脊椎動物的免疫系統具有兩種功能性的分化：體液免疫和細胞免疫。體液免疫是指免疫系統中的循環成分，它們由細胞產生或分泌，并且存在于免疫血清之中。細胞免疫是指不同類型白細胞對外來靶標物質的直接作用。這兩種相互關聯的系統之協同作用擔負起機體對千變萬化的感染性疾病的抵御。

在通常情況下，感染物對機體的侵染刺激了細胞之應答反應，這些細胞產生體液免疫的有效成分。特別是B淋巴細胞合成特殊的蛋白質、即抗體，抗體選擇性地結合在外來感染物的一些作用點上，這種結合完成以后，機體就通過細胞免疫或體液免疫;甚至直接由抗體分子本身所起的失活作用使感染物遭到破壞。

正常情況下，抗體分子不對宿主本身或者說“自身”物進行作用。然而，在某些個體中，免疫系統錯誤地將自身成分當成外來侵染物。一旦這種情況發生，機體就會以對待外來物同樣的方式向機體自身發起免疫攻擊。這種自身免疫反應的后果是可悲的。這類疾病的癥狀包括不能利用糖（Ⅰ-型糖尿病）、關節損傷（類風濕性關節炎）、腎臟損傷（內吸性紅斑狼瘡、腎小球性腎炎及類似疾病）和血管系統的損傷（脈管炎）。自身免疫系統紊亂，導致患者經受巨大的痛苦，并有相當高的死亡率。

自身免疫病持續伴有高濃度的（Blood-borne）自身免疫復合物在血液中出現。許多由自身免疫病所形成的損害可以追溯至細胞免疫系統的作用，不管在機體那個部位出現自身免疫復合物，均由該系統負責清除。過去的事實證明對這類疾病的控制是困難的，部分是由于檢測方法方面的原因，其不能妥當地鑒別開正常人和患病者之間所反映出來的免疫復合物的水平差。

在研究準確、快速和經濟的對免疫復合物檢測方法方面，已經嘗試了許多不同的技術手段，以此來為包括自身免疫病在內的;許多以產生免疫復合物為特征的疾病診治服務。雖然常有天才的發明家出現，但還沒有被認為是完好的方法。以下是先有技術方法中所受限制的例子。

首先，鰩魚（Raji）細胞測定法，它取決于細胞膜表面上的免疫復合物受體的存在，而這些受體僅僅出現于細胞培養過程中細胞生長的某些特定時期。

其次，作用于免疫復合物的補體部分或抗體，常用于進行放射免疫測定或酶聯免疫吸附測定。不幸的是，用于起固定作用的補體和抗體都是不穩定蛋白。這種不穩定性導致敏感性、專一性和再現性的喪失。因此那些依賴于補體固定作用的測定方法，無論測定中的固定作用是直接的還是通過抗體吸附介導的，都由于這種不穩定性，而使之不具備臨床檢驗的可依賴性。

另外，免疫球蛋白的種類和大小限制了補體依賴測定法（Complement-based assays）的使用。鰩魚細胞測定法和補體依賴測定法一般均不能將免疫復合物中的抗體種類和亞種詳細測出來;只限于這樣幾種：IgM、IgG₁，IgG₂，和IgG₃。鰩魚細胞測定和其它的補體依賴測定法一般僅能檢測出分子量大于：1，000，000道爾頓的復合物。正是這兩條主要限制了鰩魚細胞試驗和補體試驗。

最后一點，目前，使用如聚乙二醇、葡聚糖、金黃葡萄球菌（Staph????ylocuccus????aureas）蛋白A等物質進行沉淀的液體物理化學技術效果不佳，原因是在處理那些微小的不斷出現的絮狀物沉淀物方面仍有一些無法克服的困難。還有，與免疫無關的免疫球蛋白同沉淀物的偶然連結會更進一步降低這類實驗的結果。這些困難大大地妨礙了這類免疫復合物測量方法的應用。克服這些限制需作大量的實驗，因此而提高了對患者的收費。結果是，許多實驗沒有按要求進行，也沒有及時地、嚴格地監視患者疾病醫治方面取得的進展。開發出一種能將免疫復合物粘附在一個固體支持物上的，既經濟又有效的方法，對解決這些問題是重要的。

本發明的目的在于提供能夠選擇性地吸附或附著免疫復合物的組合物方法及材料，從而可有效地用于檢測眾多類或亞類的免疫復合物。本發明的目的之二即在于克服如前所述的將免疫復合物吸附在固相表面上用于檢測，從血清中去除免疫復合物等所有方法中的，在選擇性、穩定性和處理等方面的不足之處。本發明的目的之三在于提供新穎的、高度適用的和易于掌握的應用手段，對經過附著作用而附著在支持物上的復合物之成分進行檢測;并且進而將其用于臨床對免疫復合物進行檢測、分離和濃縮，或用于任何其它與人類或脊椎動物醫學有關的目的。

本發明所包括的是對免疫血清中或其它體液中存在的免疫復合物進行直接的不論什么機制的選擇性吸收，吸附或附著的新組合物、新方法和新材料，用于鑒別、數量化或分離的目的。