[其他]標記蛋白質的放射性鹵化小分子

無效

• 申請號: 86108331
• 申請日: 1986-12-03
• 公開（公告）號: CN86108331A
• 公開（公告）日: 1987-11-04
• 發明（設計）人: 丹尼爾·斯科特·威爾伯;艾倫·理查德·弗里茨伯格;戴維·舒斯特·瓊斯
• 申請（專利權）人: 尼奧爾克斯公司
• 主分類號: A61K43/00
• 分類號: A61K43/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 楊鋼

本發明涉及標記蛋白質，尤其是抗體的放射性囟化小分子，用于臨床診斷和治療，以及涉及把高比活放射性鹵素引進蛋白質分子。

放射性鹵化蛋白質是廣泛的科學研究的課題，并有可能作為在試管內和體內的各種各樣的臨床應用。例如，放射性碘標記的鐵蛋白用在試管中診斷測定血清內鐵蛋白濃度。放射性碘標記的甲狀腺刺激激素應用于類似的測定。

鹵素的放射性核素具有的一些特性，使它們對診斷圖象和放射性治療很有吸引力。例如，放射性碘中，碘-123（半衰期＝13小時，159千電子伏γ，電子俘獲）對于用現時的γ照相機攝象幾乎是理想的，碘-131（半衰期＝8天，364千電子伏γ，β粒子）在產生較低射線透度的圖象時，已證明在甲狀腺的臨床放射性治療中是有用的。同樣地，溴放射性核素中例如溴-75（半衰期＝1.6小時，陽電子）和溴-76（半衰期＝16小時，陽電子）具有一些特性，使它們對陽電子X線體層照相法攝象具有吸引力，溴-77（半衰期＝2.4天，一些γ，電子俘獲）具有一些特性，使它對放射性治療具有吸引力。其它放射性囟素，如氟-18（半衰期＝110分鐘，陽電子）和砹-211（半衰期＝7.2小時，α電子）對于放射性攝象及放射性治療也是具有吸引力的選擇物。

集中在癌組織的單克隆抗體的生長，由于這些抗體對腫瘤細胞表面抗原的高度專一性和親和力，增加了放射性標記抗體對診斷和/或治療的臨床應用的希望?？贵w的高度專一性使它們成為理想的選擇物，作為載體分子加上有效的放射性核素，把放射性傳送到癌部位。

遺憾的是，目前還沒有常規的用于體內的放射性鹵素標記抗體的臨床診斷或治療應用。業已證明抗體和其它蛋白質的直接放射性鹵素標記是困難的?？贵w對放射性標記反應條件顯示出不同的敏感性，以及放射性鹵化作用所必要的氧化反應條件是特別有害的。蛋白質的直接放射性碘化作用已成常規，但常常發生蛋白質生物活性的適度還原，附加的放射性標記的穩定性也會變化。例如，已發現抗體的放射性碘損失，對于某些標記抗體，在24小時內竟高達50%。放射性溴化比放射性碘化需要更強的氧化反應條件，如果得到作為氧化劑的酶并不貴和不難，則試圖直接放性溴化蛋白質正已略有成效。此外，蛋白質的直接放射性鹵化基本上發生在酪氨酰殘余物，酪氨酸的活化酚環增加了鄰位取代放射性鹵素標記生成物的內在電子不穩定性，放射性鹵素標記也蒙受空間位阻影響，并且還得到脫碘酶，該脫碘酶分解結構上類似的甲狀腺激素，例如甲狀腺素。

為直接放射性鹵化所需要的防止發生蛋白質受到苛刻反應條件的一種方法是使用小分子，該小分子可以在分離反應器中被放射性標記，隨后在適度的反應條件下連接到蛋白質。這種方法是市場上可買到的鮑爾頓-亨特試劑，N-琥珀酰亞胺基-3-（4-羥苯基）丙酸酯的依據，因此，用放射性碘得到適度的放射性標記產品（35～60%標記蛋白質的產量），但是放射性碘標記的穩定性遇到上述化學上類似的放射性碘化酪氨酰殘余物的相同問題。同樣地，市場上可買到的伍德試劑、（甲基-4-羥基苯甲亞胺酸鹽（hydroxy????benzimidate），在接合到蛋白質之前可以放射性碘化。然而，放射性碘化產品也受鄰-碘化酚的內在不穩定性影響，即使這些試劑不產生所要求的穩定放射性標記，固為蛋白質的少量減話化起固于它們的應用，故這些誠劑已廣泛用作放射性碘化。

為把高比活性放射性碘引入這些分子，需要話化芳環，固此酚環用于鮑爾頓-亨特和伍德試劑。最理想的是能夠把放射性囟素引入小分子，該小分子含有不同于酚的芳環，以致更穩定地接合放射性標記。此外，如果羥基不存在，放射性標記就較少受到電子和空間位阻的影響。

文獻中最近報導敘述了他機金屬中間體的用途，把高比活性放射性鹵素引入簡單有機分子的非活化芳環，而不引入較復雜的有機分子，這些分子可以連接到蛋白質上，并無上述缺點。

本發明提供一種快速而有效的方法，即在保存蛋白質生物活性的條件下，把高比活性鹵素放射性核素引入接合到蛋白質的小分子的非活化芳環。放射性鹵素在非活化芳環上的取代，提供了一種比現有技術在活化芳環如酚上的取代具有更穩定的放射性標記蛋白質。此外，為了使放射性標記較少受脫碘酶反應，可以在不含羥基官能度的芳環上對位或間位取代放射性鹵素。