[其他]改良酵母菌株

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• 申請?zhí)枺?/td>: 86108803
• 申請日: 1987-04-25
• 公開（公告）號: CN86108803A
• 公開（公告）日: 1988-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戴維德·T·羅格斯;托克·W·佐斯塔克
• 申請（專利權(quán)）人: 遺傳學研究所公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N1/18
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利代理部
• 代理人: 顧柏棣

1、一種增加酵母的二氧化碳和乙醇產(chǎn)生之速率的方法，所說的方法包括降低細胞內(nèi)ATP水平，從而刺激酵解。

2、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中包括在酵母基因型中以一可調(diào)節(jié)的啟動子置換編碼代謝酶之基因的天然啟動子，以允許可調(diào)節(jié)地表達所說的酶，進而允許由所說的酶催化的代謝在逆反應(yīng)的同時進行，以消耗ATP。

3、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其進一步包括對編碼代謝酶的基因進行遺傳修變，以阻止或消除對所說的酶的變構(gòu)或其它形式的抑制或失活化作用。

4、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所說的酶是果糖-1，6-二磷酸酶（FDP酶）。

5、根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中包括使編碼FDP酶的基因被誘變，以使被誘變基因的密碼子12編碼絲氨酸以外的某種氨基酸。

6、根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中使編碼FDP酶的基因進一步被誘變，以使果糖-2，6-二磷酸對酶的變構(gòu)抑制作用降低。

7、根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中編碼FDP酶的基因被進一步誘變，以使腺苷一磷酸對酶的變構(gòu)抑制作用降低。

8、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中編碼酶的基因在酵母生長的增殖期內(nèi)不被表達。

9、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中可調(diào)節(jié)的啟動子是溫度敏感性啟動子，以致使編碼酶的基因只能在預(yù)定的溫度下被表達。

10、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中表達是在由FLP蛋白催化的被調(diào)節(jié)之遺傳重組的控制下進行的。

11、根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中通過對細胞外酸性磷酸酶（AP酶）基因的遺傳修變以使AP酶保留于酵母胞漿內(nèi)，從而使細胞ATP水平降低。

12、根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中遺傳修變包括將含有編碼成熟AP酶的、沒有功能性分泌前導序列之基因的載體引入酵母細胞內(nèi)。

13、根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中載體包含一自發(fā)復(fù)制的單拷貝、含著絲粒的質(zhì)粒。

14、根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中載體包含一含有酵母2μ復(fù)制原點的多拷貝質(zhì)粒。

15、根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中載體被插入到酵母的基因組內(nèi)。

16、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中向酵母基因型內(nèi)引入一編碼代謝酶的、于啟動子的表達控制下的基因，以允許基因的組成表達，從而允許由所說的酶催化的代謝反應(yīng)與逆反應(yīng)同時進行，以消耗ATP。

17、根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中表達是進一步處于由FLP蛋白催化的被調(diào)節(jié)之遺傳重組控制下的。

18、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中包括用能夠直接或間接誘導ATP酶的化學物質(zhì)處理酵母細胞以降低ATP水平。

19、一株經(jīng)過改良的酵母，其中改良包括經(jīng)遺傳修變降低細胞內(nèi)的ATP水平，從而刺激酵解並提供一株具有高發(fā)酵活性的酵母。

20、根據(jù)權(quán)利要求19的酵母，其中的修變包括向酵母內(nèi)引入包含一缺失功能性分泌前導序列之AP酶基因的載體DNA，從而使AP酶在其中被表達但並不由細胞內(nèi)分泌出來。

21、根據(jù)權(quán)利要求19的酵母，其中的修變包括向酵母內(nèi)引入包含編碼代謝酶的、處于一可調(diào)節(jié)啟動子的表達控制下之基因的載體DNA，以允許所說的酶得以被調(diào)節(jié)的表達，進而允許由所說的酶催化的代謝反應(yīng)在逆反應(yīng)的同時進行，以消耗ATP。

22、根據(jù)權(quán)利要求19的酵母，其中的修變包括向酵母內(nèi)引入包含編碼代謝酶的、處于啟動子的表達控制下之基因的載體DNA，以允許所說的酶的組成表達，進而允許代謝反應(yīng)在逆反應(yīng)的同時進行，以消耗ATP。

23、根據(jù)權(quán)利要求22的酵母，其中表達進一步處于由FLP蛋白催化的被調(diào)節(jié)之遺傳重組的控制下。