[其他]白細胞三烯A4水解酶放射免疫測定藥盒及制備工藝

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 87102689
• 申請日: 1987-05-14
• 公開（公告）號: CN87102689A
• 公開（公告）日: 1988-11-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 富繼義;歐羅夫·洛德馬克
• 申請（專利權(quán)）人: 白求恩醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12N9/14
• 分類號: C12N9/14;G01N33/534
• 代理公司: 吉林省專利服務(wù)中心
• 代理人: 劉玉璠

1、白細胞三烯A₄水解酶放射免疫測定藥盒的制備工藝，其特征在于：

(1)由人全血中提取白細胞。

(2)由白細胞中提純白細胞三烯A₄水解酶(LTA₄H)。

(3)制備抗LTA₄H抗血清。

(4)¹²⁵I標記LTA₄H。

(5)純化¹²⁵I-LTA₄H。

(6)建立放射免疫測定方法。

2、如權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于制取白細胞粗提液后，用白細胞懸浮液和紅細胞溶解液提純白細胞;

3、如權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于由白細胞中提純LTA₄H時，用硫酸銨分段鹽析，DEAE纖維素離子交換層析，凝膠過濾層析，高壓液相離子交換層析，高壓液相羥基磷灰石柱層析，分離蛋白質(zhì)，提純LTA₄H;

4、如權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于在LTA₄H抗血清的制備時，將LTA₄H凝膠電泳純化后的凝膠，經(jīng)快速染色，脫色，顯示LTA₄H的位置，取下，制成凝膠勻漿，再免疫家兔，獲得高特異性抗血清;

5、如權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于¹²⁵I標記LTA₄H時，使用適當比例的LTA₄H，Na〔¹²⁵I〕和氯胺-T，以獲得比放射性高的¹²⁵I-LTA₄H。

6、如權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于將¹²⁵I-LTA₄H電泳后的凝膠進行放射自顯影定位，顯示¹²⁵I-LTA₄H在凝膠上的位置，將其裁割下來，用透析袋電泳洗脫，獲得高純度的¹²⁵I-LTA₄H。