[其他]對基因探針的改良

無效

• 申請號: 87102927
• 申請日: 1987-03-18
• 公開（公告）號: CN87102927A
• 公開（公告）日: 1988-04-27
• 發明（設計）人: 亞歷克·約翰·杰弗里斯
• 申請（專利權）人: 帝國化學工業公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P19/34;G01N33/53
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 林玉貞,曹恒興

1、制備能夠雜交到含有一小隨體之DNA片段上的多核苷酸的方法，所說的小隨體是對基因組中的特定區域或位點特異的，上述區域或位點具有至少為3(100)的等位基因變異(如說明書所定義的)。

該方法包括克隆一個通過將基因組DNA的片段與一多核苷酸探針雜交而鑒定的DNA片段，該多核苷酸探針能夠參考一個以上的多態性小隨體區域或高可變位點以鑒別DNA；

由之制備能夠雜交到一含小隨體之DNA片段上的多核苷酸，該小隨體對于基因組中的某特定區域或位點是特異的，而所說的區域或位點具有至少為3(100)的等位基因變異(如說明書中所定義的)。

2、根據權利要求1的方法，其中所說的DNA片段，其含有一源自小隨體區域高可變位點的小隨體，所說的區域或位點具有至少為3的等位基因變異（如說明書中所定義的）。

3、制備能雜交到含有一小隨體之DNA片段上的多核苷酸的方法，所說的小隨體是對基因組中的特定區域或位點特異的，上述區域或位點具有至少為3的多態性程度（如說明書中所定義的）。

該方法包括克隆一個通過將基因組DNA的片段與一多核苷酸探針雜交而鑒定出的DNA片段，該多核苷酸探針能夠參考一個以上的多態性小隨體區域高可變位點以鑒別DNA;

由之制備能夠雜交到一含小隨體之DNA片段上的多核苷酸，該小隨體對于基因組中的某特定區域或位點是特異的，所說的區域或位點具有至少為3的多態性程度（如說明書中所定義的）。

4、根據上述任一權利要求的方法，其中多核苷酸探針包含同時包括有己標記或標志組件的、至少含3個串聯重復（在所有串聯重復之序列間平均至少有70%的同源性）序列的多核苷酸，這些序列與基因組的小隨體區是同源的，其相似程度為能使探針雜交到用限制性核苷酸內切酶切斷樣品DNA所得到的一相應之DNA片段上，其中：

a）每次重復都含有一個核心，該核心與來自不同之基因位點的多個小隨體中存在之有相似長度的相符核心區至少有70%的同源性（即70%相符）;

b）該核心長度為6至16個核苷酸;

c）對該核心沒有貢獻的重復單元中核苷酸的總數不超過15個。

5、根據上述權利要求之任一項的方法，其中多核苷酸探針包含序列（包括其互補序列）

（A）AGGGCTGGAGG

（其中T是T或U，（A）可有可無），或序列（包括其互補序列）

AGAGGTGGGCAGGTGG

（其中T是T或U）的至少三次串聯重復;所有串聯重復的序列之間至少有70%相符合。

6、根據權利要求5的方法，其中多核苷酸探針包含有選自：

AGGAATAGAAAGGCGGGYGGTGTGGGCAGGGAGRGGC??3

GTGGAYAGG??4

TGGGAGGTGGRYAGTGTCTG??5

GAATGGAGCAGGYGRCCAGGGGTGACTCA??6

GGGCTGGGGAGATGGTGGAGGAGGTGTTGG??7

AGGCTGGGGAGATGGTGGAGGAAGAGTAC??8

TGTGTGTAATGGGTATAGGGAGGGCCCCGGGAAGGGGGTGTGGYX??9

（其中Y是C、T或U，X是G或C，R是A或G，T是T或U）的任何一個序列或其串聯重復，或與之互補的序列。

7、根據權利要求1-5中任一項的方法，其中所說的片段含有一得自小隨體區或高可變位點的小隨體，該區域或位點可用含有序列式3之序列或其串聯重復、或其互補序列的多核苷酸探針檢測出來，該方法是在能有效地鑒定單一位點的雜交條件下實施的。

8、根據權利要求1-5中任一項的方法，其中所說的片段含有一來自小隨體區或高可變位點的小隨體，所說的區域或位點可用包含選自序列式4至9的任一序列或其串聯重復，或與之互助之序列的多核苷酸探針檢測出來，該方法是于能有效地鑒定某單一位點的雜交條件下實施的。

9、根據前述權利要求中之任一項的方法，其中多核苷酸序列是與含小隨體之DNA片段中的小隨體同源的，且相符程度為能使該核苷酸序列與之雜交。