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[發(fā)明專利]提取分離海州香薷中迷迭香酸、芹菜素和木犀草素的方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201310042896.5 申請日: 2013-01-31
公開(公告)號: CN103130644A 公開(公告)日: 2013-06-05
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 彭紅云;邢嚴(yán);張良;章國林;申有青;王會平;曾衛(wèi)衛(wèi) 申請(專利權(quán))人: 浙江大學(xué)
主分類號: C07C69/732 分類號: C07C69/732;C07C67/48;C07C67/56;C07D311/30;C07D311/40
代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212 代理人: 金祺
地址: 310058 浙江*** 國省代碼: 浙江;33
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 提取 分離 海州 香薷 中迷迭香酸 芹菜 木犀 方法
【權(quán)利要求書】:

1.提取分離海州香薷中迷迭香酸、芹菜素和木犀草素的方法,其特征在于依次包括以下步驟:

(1)、乙醇浸提:將盛花期收獲的海州香薷花枝和葉片風(fēng)干后粉碎,用體積濃度≥95%的乙醇溶液浸提,所得的提取液經(jīng)真空濃縮后得粗浸膏;將粗浸膏用水溶解,得溶解液;在溶解液中加入石油醚萃取,所述石油醚與溶解液的體積比為1:0.9~1.1,棄石油醚層;在所得的水層中加入乙酸乙酯反復(fù)萃取,直至乙酸乙酯萃取層無顏色;所述每次萃取時(shí)乙酸乙酯的用量是溶解液體積的0.9~1.1倍;將所有的乙酸乙酯萃取層合并后濃縮,得棕黑色浸膏;

(2)、大孔樹脂粗分離:將所得的棕黑色浸膏制成水溶液,上樣于D101大孔樹脂并充分吸附,依次用水以及體積濃度為10%、20%、30%、40%的乙醇溶液以1.4~1.6BV/h梯度進(jìn)行洗脫分離;收集體積濃度為30%和40%乙醇溶液對應(yīng)的洗脫液,濃縮得到黃棕色浸膏;

所述棕黑色浸膏與D101大孔樹脂的用量比為:1g棕黑色浸膏/10~15mlD101大孔樹脂;

所述每100ml水溶液中含有15~25g的棕黑色浸膏;

所述水、體積濃度分別為10%、20%、30%、40%的乙醇溶液的用量分別為:0.8~1.2BV、1.8~2.2BV、4.8~5.2BV、5.8~6.2BV、3.8~4.2BV;

(3)、聚酰胺柱分離:將所得的黃棕色浸膏用甲醇溶解,得溶液,所述黃棕色浸膏與甲醇的用量比為1g/2~5ml;按黃棕色浸膏與聚酰胺粉為1:1~2的質(zhì)量比,在所述溶液中加入聚酰胺粉,得到的懸濁液在20~30℃下減壓濃縮至干,得粉狀上樣物;

按黃棕色浸膏與聚酰胺的質(zhì)量比1:30~50的比例,取依次經(jīng)乙醇和水處理后的聚酰胺溶液倒入層析柱中,并用二氯甲烷置換聚酰胺溶液中的水;

將粉狀上樣物均勻上樣于聚酰胺柱頂端,以CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=(60:1:3),(50:1:2.5),(40:1:2),(30:1:1.5),(20:1:1)的體積比濃度梯度進(jìn)行加壓梯度洗脫,用TLC分析,以CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=20:2:1為展開劑,通過質(zhì)量濃度3%的FeCl3乙醇溶液顯色指示,根據(jù)顯色斑點(diǎn)分布情況,收集成份相似的洗脫液;分別減壓濃縮,25~50℃逐漸升溫旋蒸至干,從而分別得到浸膏A、浸膏B、浸膏C;其中,

浸膏A對應(yīng)濃度梯度為CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=60:1:3;

浸膏B對應(yīng)濃度梯度為CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=?50:1:2.5以及CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=40:1:2;

浸膏C對應(yīng)濃度梯度為CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=?30:1:1.5?CH2Cl2:CH3OH:HCOOH=?20:1:1;

(4)、硅膠柱層析純化精制:

①、將硅膠用乙酸乙酯或石油醚溶解后加壓裝柱,硅膠與乙酸乙酯或石油醚的質(zhì)量體積比為1g/4~8ml;所述配套浸膏A的硅膠用乙酸乙酯溶解,配套浸膏B和配套浸膏C的硅膠均用石油醚溶解;

②、將上述所得的浸膏A、浸膏B和浸膏C,分別進(jìn)行以下操作:用甲醇溶解后加入硅膠進(jìn)行拌樣,硅膠與浸膏A、浸膏B和浸膏C的重量比均為2:1~4:1;旋干后將所得的3種拌樣分別裝在柱頂端,上樣后分別進(jìn)行硅膠柱層析純化精制;從而分別對應(yīng)的得到芹菜素、木犀草素和迷迭香酸;

所述步驟①所用的硅膠的總重量與步驟②拌樣用硅膠的重量比為20~30:1。?

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1、專利原文基于中國國家知識產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

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